冰冻切片实验步骤：固定，脱水，提到脱水，透明，浸蜡，包埋，切片。冰冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷却到硬度，然后进行切片的方法； 因其制作过程较石蜡切片快捷、简便， 而多应用于手术中的快速病理诊断。

　　一、冰冻切片服务介绍

　　冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到硬度，然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。冰冻切片的种类较多，有低温恒冷箱冰冻切片法，二氧化碳冰冻切片法，甲醇循环制冷冰冻切片法等。

　　二、冰冻切片应用

　　（1）在手术进行中，突然发现病人的病变与原诊断，原定手术方案不相符合，或者怀疑时，需要病理确定。

　　（2）了解**结内是否有转移的肿瘤细胞，或者转移的程度，以利于确定是否需要扫除**结或者其它的**措施。

　　（3）对于已确定为恶性肿瘤的患者，则需要了解其手术范围是否足够，上下切缘是否有残存的肿瘤组织。

　　（4）在做剖腹探查时所发现的肿块或者异样的组织。

　　（5）显示组织中的脂肪和脂类物质，这常见于某些病例如脂肪瘤及肉瘤，某些科研组织等。

　　（6）某些酶的显示如ATP酶，琥珀酸脱氢酶等。

　　（7）神经病理学技术中的某些染色法如：Eager氏法，Marchi氏法，Cajal氏法，Hortega氏法和Holzer氏法等。

　　（8）对某些物质所进行的**荧光的研究。

　　三、冰冻切片操作方法及步骤

　　①取材，未能固定的组织取材，不能太大太厚，厚者冰冻费时，大者难以切完整，好为24×24×2mm。

　　②取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上，冰冻。小组织的应先取一支承器，滴上包埋剂让其冷冻，形成一个小台后，再放上细小组织，滴上包埋剂。

　　③将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗进退键，转动旋钮，将组织修平。

　　④调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5～10um间。

　　⑤调好防卷板。制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求操作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。切片时，切出的切片能在时间顺利地通过刀防卷板间的通道，平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板，取一载玻片，将其附贴上即可。

　　⑥应视不同的组织选择不同的冷冻度。冷冻箱中冷冻度的高低，主要根据不同的组织而定，不能一概而论。如：切未经固定的脑组织，肝组织和**结时，冷冻箱中的温度不能调太低，在-10- -15℃左右，切甲状腺、脾、肾、肌肉等组织时，可调在-15～20℃左右，切带脂肪的组织时，应调至-25℃左右，切含大量的脂肪时，应调至-30℃。