慢性气管炎本病多发生在中年人年龄组,病程缓慢,多数隐潜起病,初起在寒冷季节发病。下面Bybiotech分享一篇源自《常见人类疾病动物模型的制备方法》的实验文章,让大家对脂多糖诱导慢性支气管炎有所了解。
【操作步骤】
SD大鼠,体重190~250g,鼠龄12周,1%戊巴比妥钠50mg/kg,腹腔注射麻醉,以仰卧位固定于操作台,以静脉套管针代替气管导管,拔除针芯,快速插入气管,将脂多糖(lipopolysaccharides, LPS, Sigma公司)200/μg注入气管内,饲养3周左右。将大鼠以1%戊巴比妥钠50mg/kg腹腔注射麻醉,仰卧固定,暴露气管,在环甲膜处剪一小口,将静脉套管针套管插入左主支气管,用10ml Hank液分3次灌洗,灌洗液离心(1500转/分,10min),细胞用Hank液洗涤后,用血细胞计数板做细胞计数。余液制成细胞涂片,瑞氏染色行细胞分类计数。
【注意事项】
在诱发实验动物慢性支气管炎时,动物的肺部容易自发感染,随着动物日龄的增长,可以引起不同程度的增生,影响实验结果的正确分析,所以应注意选择年龄稍小、健康状况好的动物,避免动物自发的感染。
【结果分析】
观察指标:小鼠、大鼠、豚鼠慢性支气管炎病变以支气管黏膜杯状细胞增多、上皮细胞增生及慢性炎症细胞浸润最为常见,特别是在支气管及末梢细支气管见到这些改变,就可以作为慢性支气管炎的形态学诊断指标。而纤维组织增生及末梢支气管扩张或肺气肿等可能与刺激时间较久有关,仅可作为参考指标。