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2022-01-06
分子实验-免疫组化结果分析(免疫组化结果如何分析)
一抗4度孵育后为什么要进行37度复温?(1)一方面,防止切片从4度直接放入PBS易脱片;(2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。(3)其实,我
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2022-01-05
分子实验-PCR实验过程中如何消除引物二聚体
相信很多人一听到引物二聚体的时候都会很愤怒,因为几乎我们每个人都受到过它的折磨。它作为 PCR 的副产物,甚至有时候是主要产物充斥着我们的整个 PCR 实验过程。你在被它折磨的不行不行的时候,你有想过它为什么总是出现在你的实验结果中吗?我认为还是你对它不够了解,知己知彼方能百战不殆,当你对它足够了解时,
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2022-01-05
分子实验-有关实时荧光定量PCR技术讲解
实时荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光染料,利用荧光信号来实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板浓度进行定量分析。其特点有:(1)用产生荧光信号的指示剂显示扩增产物的量,进行实时动态连续的荧光监测,避免终点定量的不准确性,并且消除了标本和产物的污染,且无复杂的产物后续处理过
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2022-01-04
分子实验-做免疫印迹实验过程中会出现的问题
1. Western blot结果中的背景为什么较高?可能的原因及建议1.膜封闭不够——延长封闭的时间;选择更加适合的封闭液。2.一抗稀释度不适宜——对抗体进行滴度测试,选择最适宜的抗体稀释度。3.一抗孵育的温度偏高——建议4℃结合过夜。4.膜在实验过程中干过——实验过程中要注意保持膜的湿润。5.检
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2022-01-04
分子实验-免疫印迹的基本原理实验步骤
Western Blot原理Western Blot(免疫印迹)采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。SDS-PAGE可对蛋白质样品进行分离,转移到固相载体——例如硝酸纤维素薄膜(NC)上。固相载体可以吸附蛋白质,并保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。转移后的NC膜就称为一
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2022-01-03
分子实验-怎么看免疫共沉淀的图(免疫共沉淀的图怎么分析)
Co-IP是检测分子间相互作用的常用技术,德泰发现有很多实验人员反映在查看论文文献的过程中,遇到Co-IP实验结果图不知道如何进行分析。本文从不同的文献中找了四个Co-IP的结果图,用案例的方式对如何分析Co-IP实验结果图进行介绍。Co-IP结果如何看?首先需要说明的是,熟悉了解免疫共沉淀实验的原理及实验的操作
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2022-01-03
分子实验-免疫共沉淀(co-IP)实验技术原理
蛋白间相互作用是细胞各种基本功能的主要完成者,参与几乎所有的重要生命活动。因此,蛋白-蛋白相互作用研究以及建立相互作用的关系网络图,具有十分重要的意义,也是目前蛋白质研究领域的热点。Co-IP(免疫共沉淀,co-inmunoprecipitation)是经典的利用抗体从样品中捕获靶蛋白及其互作蛋白、复合体的一项技术,能
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2022-01-02
分子实验-分子互作实验原理及技术流程
分子互作是生命体的普遍主题,分子互作技术是生命科学的基础技术。分子互作包含核酸与核酸互作、核酸与蛋白互作、蛋白与蛋白互作这三种类型。随着人类基因组计划的完成,后基因组时代的深入,测序、质谱、生物信息联合分析等技术的进一步发展,使得高通量筛选生物标记物、寻找生物关联分子变得可能,同时对分子互作技术
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2022-01-02
分子实验-染色质免疫共沉淀(ChIP)原理及注意事项
早期,人们就发现在细胞的生命活动中,DNA复制、mRNA转录与修饰以及病毒的感染等,都涉及基因-蛋白质相互作用,很多生理学家都探讨了这种现象的发生过程。近年来,随着研究的深入,很多医学研究者已经将目光投向了基因-蛋白相互作用,期望在此水平上,另辟蹊径,深入分析癌症、心血管疾病、中央神经系统紊乱等疾病的
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