-
实验原理
PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上主要用来检测组织中的糖类,也称为糖原染色。其原理为过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,Schiff试剂和醛基反应使检体呈现紫红色。 -
实验步骤
1、脱蜡至水:将切片依次浸入以下溶液
① 二甲苯Ⅰ 15min
② 二甲苯Ⅱ 15min
③ 无水乙醇 5min
④ 90%乙醇 3min
⑤ 80%乙醇 3min
⑥ 70%乙醇 3min
⑦ 蒸馏水 3min,重复3次
⑧ PBS缓冲液 3min,重复3次
2、阿利新蓝染色液染色:
使用阿利新蓝染色液对组织进行滴染或者浸染10-20min。用蒸馏水洗3min,重复3次。
3、氧化剂氧化:
使用氧化剂对组织进行氧化5min。用自来水简单冲洗后,用蒸馏水重复洗2次,每次3min。
4、Schiff Reagent侵染:
将组织放入Schiff Reagent染液中浸染10-20min(也可采用滴染),浸染结束后用流水冲洗10min。
5、复染细胞核:
苏木素复染2min,细胞核变蓝色即可终止,自来水冲洗3min。
6、分化:
酸性分化液分化2-5s,自来水冲洗3min。
7、返蓝:
用Scott蓝化液进行返蓝1-2min,返蓝结束后用流水冲洗3min。
8、脱水:将切片依次浸入以下溶液
① 70%乙醇 1min
② 80%乙醇 1min
③ 95%乙醇 2min
④ 100%乙醇 4min
9、封片:
① 风干组织切片
② 用胶头滴管将中性树脂滴在组织上
③ 盖上盖玻片后轻轻按压,使中性树脂覆盖组织,静置晾干
10、显微镜观察并记录
-
实验结果