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实验原理
苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining),简称he染色法,是石蜡切片技术里常用的染色方法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 -
实验步骤
1、脱蜡:将切片依次浸入以下溶液
① 二甲苯Ⅰ10min
② 二甲苯Ⅱ10min
③ 95%乙醇30s
④ 85%乙醇30s
⑤ 75%乙醇30s
⑥ 流水冲洗20s
2、染色:
① 苏木素,浸泡2min
② 流水冲洗去多余的苏木素,冲洗至水流澄清
③ 盐酸乙醇,分化15s
④ 氨水,返蓝15s
⑤ 流水冲洗5min
⑥ 95%乙醇,浸泡12s
⑦ 伊红染液,浸泡10s
⑧ 流水冲洗去多余的伊红染液
3、脱水:
① 95%乙醇,脱水12s
② 无水乙醇Ⅰ,脱水12s
③ 无水乙醇Ⅱ,脱水12s
4、封片:
① 风干组织切片
② 用胶头滴管将中性树脂滴在组织上
③ 盖上盖玻片后轻轻按压,使中性树脂覆盖组织,静置晾干
5、显微镜观察并记录
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实验结果