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实验原理
免疫沉淀是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后，再与ProteinA/G或二抗偶联的珠子孵育，通过离心得到珠子-ProteinA/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物，沉淀经过洗涤后，重悬于电泳上样缓冲液，煮沸5~10min，在高温及还原剂的作用下，抗原与抗体解离，离心收集上清，上清中包括抗体、目的蛋白和少量的杂蛋白。 -
实验步骤
1.收获细胞，加入适量的细胞IP裂解缓冲液，冰上或4℃裂解，离心，取上清
2.在细胞裂解液中加入一定量的相应抗体和ProteinA/G珠子，4℃缓慢摇晃孵育过夜
3.离心，去上清，用裂解缓冲液清洗沉淀3~4次，加入加样缓冲液，沸水煮
4.取沉淀的免疫复合物进行后续分析，如SDS-PAGE、Western blot、质谱等
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实验结果
