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实验原理
Hoechst染色是一种荧光染色方法，主要用于核酸染色。该染料可以结合DNA的碱基，从而在显微镜下使细胞核呈现出蓝紫色的荧光。细胞凋亡时，其核酸会发生断裂和降解，导致DNA的碱基暴露在细胞核中。Hoechst染料能够结合这些裸露的碱基，从而使细胞核染色。凋亡细胞由于其DNA碎片化，在Hoechst染色下不同于正常细胞。 -
实验步骤
1、细胞复苏生长
2、弃上清，用PBS轻洗2次
3、加入胰酶消化，显微镜下观察，细胞变圆收缩
4、加入完全培养基，吹打均匀，转移到离心管，离心
5、弃上清，加入新鲜完全培养基，吹匀
6、取适量细胞悬液加入EP管中，计数
7、在培养皿中铺入细胞，放入培养箱中培养24h
8、弃去培养液，PBS洗1次，甲醇固定10~15min，PBS洗3次，每次5min
9、加入配置好的Hoechst染色工作液，室温避光放置3~5min后，吸除染色工作液
10、PBS洗2~3次，每次3~5min
11、荧光显微镜观察并记录
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实验结果
