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实验原理
外泌体（Exosome）是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30~200nm，密度在1.13~1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞（免疫细胞、神经细胞、干细胞等）都可以产生并释放外泌体。目前外泌体提取主要有超速离心、过滤离心、试剂盒提取等方法。 -
实验步骤
细胞复苏生长
弃上清，用PBS清洗2次
加入胰酶消化，显微镜下观察，细胞变圆收缩
加入完全培养基，吹打均匀，转移至离心管，离心
弃上清，加入新鲜完全培养基，吹匀
取适量细胞悬液加入EP管，计数
在大皿中铺入细胞，放入培养箱培养24h，24h后更管无血清培养基继续培养72h
收集细胞上清液，离心
再收集上清液，再次离心，过滤
取适量细胞培养上清液至EP管中，加入Exosome分离纯化溶液，4℃混匀过夜
离心，吸除上清
离心，去除残液，加PBS或去离子水重悬混匀Exosome沉淀
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实验结果
