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实验原理
细胞克隆实验是用于检测细胞增殖能力、侵袭性、对杀伤因素敏感性的重要方法。其原理是将细胞分离成单细胞悬液,在培养基上接种培养,根据集落形成数量和大小来检测细胞增殖能力。根据培养基是否需要软琼脂,克隆形成实验可以分为平板克隆实验(PCF)和软琼脂克隆实验(SACF)。 -
实验步骤
细胞复苏生长
进行细胞传代
离心,弃上清,加入新鲜完全培养基,吹匀
对细胞密度进行计数
在培养皿中按梯度铺克隆的皿
加入新鲜培养基,再加入细胞悬液,用移液器吹匀,放入培养箱中培养10天
弃去培养基,PBS洗2遍
甲醇固定后,姬姆萨染液染色,自来水冲洗
拍摄细胞群落
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实验结果