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实验原理
细胞划痕实验又叫伤口愈合实验(Wound-Healing Assay),常用于检测细胞迁移运动和修复能力。其原理是当细胞长至融合成单层状态时,在融合单层细胞上人为制造一个空白区域,称为“划痕”。处于划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域,使“划痕”愈合。细胞迁移过程中定期捕获图像,通过测量不同时间点的划痕间距并计算差值,用于判断细胞的迁移能力。 -
实验步骤
1.细胞复苏生长
2.弃细胞废液,用PBS洗2次
3.加入胰酶进行消化,显微镜下观察到细胞变圆收缩
4.加入完全培养基,吹匀,转移到离心管,进行离心
5.弃上清液,加入新鲜完全培养基,吹匀
6.取适量细胞悬液进行计数
7.将细胞混匀,放入二氧化碳培养箱中培养
8.划线
9.分别于划线后0h、24h、48h、72h进行拍照
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实验结果