已知胶原纤维有四型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ),区分并定量这四种胶原纤维,对于研究病变的发生机理和演变过程有一定的意义。
实验原理
天狼猩红(Sirius Red)是强酸性染料,易与胶原分子中的碱性基团结合,吸附牢固。胶原分子与天狼猩红结合后加强双折光现象,使不同颜色和形态的胶原纤维得以区分。
实验步骤
01、脱蜡至水:二甲苯Ⅰ 15min二甲苯Ⅱ 15min95%酒精 30s80%酒精 30s75%酒精 30s流水洗 20s
02、Weigert铁苏木素 10min流水洗 30s
03、盐酸乙醇 15s流水洗 5min95%乙醇 12s
04、天狼猩红染液 60min弱酸溶液清洗 24s
05、无水乙醇 12s重复无水乙醇 12s
06、晾干后封片
实验结果
I型胶原纤维:紧密排列,显示很强的双折光性,呈黄色或红色。
II型胶原纤维:显示弱的双折光,呈多种色彩的疏松网状分布。
III型胶原纤维:显示弱的双折光,呈绿色的细纤维。
IV型胶原纤维:显示弱的双折光的基膜,呈淡黄色。