脑性瘫痪(cerebral palsy,CP)简称脑瘫,是婴儿在出生前后一个月内由各种原因所引起的颅脑损伤或发育缺陷,进而导致姿势异常或者运动障碍,属于非进行性脑损伤。目前,脑瘫已成为儿童致残的主要疾病之一。成功建立近似于人类脑瘫的脑损伤机制与临床表现的动物模型是深入研究其发病机制、进行有效干预的基础。
实验原理
缺血缺氧模型是比较常用的脑瘫动物模型,本次实验采用双侧颈动脉结扎法,制造缺血缺氧性脑病的特征,是运用较为广泛的脑瘫动物模型。
实验步骤
1、术前8h禁食,自由饮水,将大鼠放入铁托盘中进行称量,得到具体体重后,进行麻醉
2、等待大鼠麻醉后,使大鼠仰卧于泡沫板上,固定四肢,用碘伏消毒
3、剪断大鼠尾端3mm放血,放血量控制在10%以内(6ml/kg体重以内)
4、逐步切开颈部皮肤,切开胸骨舌骨肌,暴露气管,沿气管两侧分离左右颈总动脉,穿线备用
5、将双侧颈总动脉用3-0缝合线结扎,结扎20min后打开再灌注10min,重新结扎双侧颈总动脉20min,如此反复3次后,抽去穿线,缝合伤口
实验结果
动物清醒后,神经症状采用改良的Tarlov分级评定法。
0级:完全瘫痪,不能做任何运动;
1级:严重瘫痪,不能支撑身体,可以有轻微的运动,但不能做类似于爬行动作;
2级:瘫痪,不能支撑身体,但能做爬行动作;
3级:轻度瘫痪,能够支撑身体,步态不稳,有跛行;
4级:无瘫痪,行走自如。
肌张力采用改良Ashworth痉挛量表(MAS)。
0级:大鼠活动自如;
1级:在屈伸过程中出现一过性停顿;
2级:肢体尚易屈伸,有轻度共济失调;
3级:被动活动困难,有中度共济失调;
4级:肢体屈伸受限,有重度共济失调。
出现3级及3级以下瘫痪,肌张力达到1级及1级以上即为模型成功。