一般来说,对transwell侵袭实验结果统计分析有两种方法。
1.直接计数法:
通过给细胞染色,直接在镜下计数。选择不同的视野拍照(一般选择呈现视野中穿过的细胞),计数的结果可做成统计图,辅助呈现数据,如下图:
骨肉瘤细胞U2OS迁移及侵袭图结果图
2.间接计数法
间接计数法主要用于穿过细胞过多,而无法通过计数获得准确的细胞数所采用的方法,与常用的MTT实验是同样的原理。它包括: MTT法、 荧光试剂检测、 结晶紫检测。
选择酶标仪测OD值做成统计图。在上述染色后,用3%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,取洗脱液在酶标仪上测量OD值(570nm),间接反映细胞数目,如下图:
人脐静脉内皮细胞(HUVEC)迁移图
上述方法,我们该如何选择?
实际上,我们一般选择直接计数法,但是在遇到细胞数量过多,难以计数时,我们可以选择第二种方法。