低温冷冻脑损伤模型是一种类似于人脑挫伤的动物模型,主要为血管源性脑水肿,是常用的颅脑损伤实验模型。该模型具体制作方法:手术前大鼠禁食l晚,不禁水。动物称重后,用2%硫喷妥钠(40mg/kg体重)腹腔注射麻醉成功后,动物头部固定于江湾Ⅰ型C立体定向仪上,头部备皮,安尔碘消毒后,于中线切开头皮,剥离骨膜,在冠状缝后、人字缝前、矢状缝右侧显微手术电钻颅骨钻孔。骨窗直径为5mm,用于致伤和行颅内压监测。将自制冷冻杯置入液氮中1min预冷,盛入液氮后迅速从液氮罐中取出,立即盖上杯盖,用冷冻杯底部与硬脑膜充分接触15s,冷冻处硬脑膜和邻近颅骨由白色恢复至周围组织同样颜色的时间一般为8~10s,表示冷冻良好。正常对照组动物不做麻醉和手术处理;假冻伤组与冻伤组同样行麻醉和开颅手术,但不冷冻,以盛有37℃生理盐水的冷冻杯与硬脑膜充分接触15s行假冷冻。
术后进行颅内压的测定:假冻伤组和冻伤组各取6只动物,在上述操作结束后立即监测颅内压。将ALC-MPA型多道生物信号分析系统的颅内压探头由骨窗处向前方放置于颅骨下硬脑膜外,然后将硬脑膜及骨窗周围颅骨外板和软组织用无菌棉球拭干,用医用耳脑胶封闭颅骨与硬脑膜之间的缝隙,骨瓣复位。骨窗边缘的颅骨外板上钻一直径约1mm微孔,固定小螺丝钉1枚,最后用自凝牙托水泥封闭骨窗,在此过程中,务必做到严密封闭。颅内压持续监测6h,每间隔1h取2min的平均值作为测得值记录,并进行统计学分析。
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