资讯动态

流式细胞术中如何减少死细胞的比例(减少样品中死细胞比例的方法)

2022-03-23 10:40:44
|
访问量:118822

  流式样品细胞中一般都含有一定量的死细胞,通过一定的方法可以减少样品中死细胞的比例,但是完全去除样品中的死细胞几乎是不可能的。流式分析的目标是活细胞,流式分选的对象更要求是活细胞,所以如果在流式分析时将死细胞当作活细胞来分析,会严重影响流式分析结果。

  减少样品中死细胞比例的方法

  一般流式分析者都希望样品中死细胞尽可能少,保证流式结果的准确性,而样品准备的过程会直接影响到样品中死细胞的比例,下面列举了在样品准备过程中需要注意的事项,以尽量减少死细胞的产生。

  (1)如果是直接从实验动物中获取目标细胞进行流式分析,需尽量缩短从处死动物到获得可以上样分析的样品细胞的时间,尽可能地减少在样品准备过程中细胞的死亡。细胞离体后一般都会在一段时间后死亡,室温下,样品准备时间不应超过5h;4℃条件下,不应超过10h。如果短时间内无法处理已经从动物中获得的细胞,应将细胞置于4℃冰箱中;如果长时间无法处理,则应将细胞置于无菌培养板中,在孵箱中培养,保持样品细胞的活力。

  (2)如果从脏器中通过研磨获得单细胞悬液,研磨时动作应轻柔,切不可强行研磨,否则得到的可能是细胞碎片而不是活细胞。研磨棒的头部最好是柔韧性较好的橡胶,以减轻机械研磨对细胞的损伤。

  (3)配制PBS缓冲被时,应根据配方严格配制,尤其注意确保缓冲液的渗透压,同时还应注意缓冲液的pH。

  (4)在准备样品细胞的过程中,常需要离心样品细胞,离心速度的控制也是比较重要的。在能够完全离心得到目标细胞的前提下,应尽量降低离心速度、缩短离心时间,避免离心速度过高、离心时间过长对细胞的损伤,否则产生大量细胞碎片,甚至会导致细胞死亡。

  (5)分选细胞时耗时较长,在样品制备中可以加入适量的培养基,使细胞从培养基中吸收营养物质,延长细胞存活时间;如果分选型流式细胞仪配备有温控系统(或者冷却系统),则可将整个样品分选过程和分选后的细胞都控制在4℃条件下,以提高细胞的活力,减少死细胞的产生。


文章推荐
产生抗体的细胞是什么细胞(能产生抗体的细胞是)
2022-03-03
抗体是免疫系统从身体的免疫球蛋白储存中产生的蛋白质。一个健康的免···
原核DNA复制酶、步骤和意义(原核dna复制过程中需要哪些酶)
2022-02-03
DNA复制是生物体将其DNA复制成另一个副本并传递给子细胞的过程。复制···
细胞实验外包-研究细胞活力和细胞凋亡的实验方案
2021-11-29
研究细胞活力和细胞凋亡的实验方案1、贴壁细胞:去除培养基并用 PBS ···
基因检测:不同的生化反应速度导致物种特异性的分节时钟周期
2021-08-30
在一项新的研究中,来自日本理化学研究所、京都大学、西班牙欧洲分子···
喜报|立效顺利取得浙江省病原微生物实验室备案证书!
2024-09-09
8月19日,经过绍兴市卫生健康委严格审查和现场核查后,立效(浙江百越···
【声明】强烈谴责假冒「立效」的行为!请大家提高警惕!
2024-03-25
近日,科研服务市场上出现多起不法分子冒用「立效」名义进行服务宣传···
大鼠心脏纤维化造模操作步骤(手把手教你做大鼠心脏纤维化造模实验)
2023-04-16
心肌钙化,又称为心肌纤维化,是由中、重度的冠状动脉粥样硬化性狭窄···
细胞传代实验操作步骤(手把手教你做细胞传代实验)
2023-04-16
传代培养是细胞培养常规保种方法之⼀,也是几乎所有细胞生物学实验的···
  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×
留言咨询

感谢您的关注,如有需要请留言,我们会尽快和您联系!