细胞是试验的基础,养好细胞是试验成败的关键,然而在养细胞的过程中,我们总是遇到各种各样的问题,这里,我们来了解下关于细胞污染的问题!
首先我们来看下细胞污染的类型:
一、细菌污染(较容易被发现)
二、霉菌污染(较容易被发现)
三、支原体污染(难被发现)
四、黑胶虫污染
五、病毒污染
六、交叉污染
其次我们来了解下细胞污染的原因有哪些呢?
一、菌类污染:菌类污染通常是操作不规范或无菌措施不到位等引起的,这类污染通常容易观察。
1、细菌污染:
细胞污染后的变化:
①污染后由于有大量酸性物质产生,因此培养基会短时间内由红色变为黄色;
②由于细菌大量增殖,培养基变浑浊,稍微震荡后可见培养基表面有漂浮物;
③普通倒置显微镜高倍镜观察,胞浆内可见大量颗粒;
④细胞生长缓慢,逐渐变圆脱落。
细菌污染种类:白色葡萄球菌,大肠杆菌,假单孢菌、枯草杆菌等。
2、霉菌污染:
细胞污染后的变化:
①一般来说,培养液不会变浑浊;
②比较容易发现,肉眼可见点状菌落(淡黄色或者白色)漂浮在培养基表面;
③普通倒置显微镜下观察,可见絮状交错的菌丝或菌团生长在细胞之间;有时真菌并不是直接分布于细胞贴壁层,需要通过调整显微镜仔细观察寻找菌丝或菌团。
二、支原体污染:支原体污染是最麻烦的,通常来源有这几个1、已受污染的细胞2、操作人员的疏失3、已受污染的培养基、血清4、操作环境不良、实验器具不洁等。由于支原体为人体口腔中之正常菌丛,实验室之操作人员的污染亦可能为污染源,须十分注意。而万一细胞已受支原体污染时,最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃,以免污染其它洁净的细胞株。
细胞污染后的变化:
①培养液不变浑浊,但会很快变成黄色;
②多数细胞在形态方面少有明显变化;
③在倒置显微镜下可见胞浆出现小颗粒或空泡;
三、黑胶虫污染
引起原因:往往来源于血清;
细胞污染后的变化:
①低倍镜下观察时可见黑色小点,高倍镜下可见到其做布朗运动,像小虫游来游去;
②细胞培养液仍然清亮,污染较轻时对细胞无影响;若太多就会对细胞造成影响。
四、病毒污染
引起原因:病毒可能来自于血清;
细胞污染后的变化:
①污染后培养液无明显变化;
②大部分细胞也不会有明显的形态变化;
六、交叉污染
引起原因:两种或两种细胞以上的实验同时进行,实验器具、试剂等混用而易造成的污染,这就纯属个人原因了,所以我们在试验的时候一定要做好防护,按标准操作。
以上就是常见的几种细胞污染的种类,我们可以看到主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。 严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。