具中科博生研究表明,直接从动物体内取出后在体外环境中直接培养的细胞,在其传代之前称为原代培养细胞。
随着培养细胞的继续增殖,在达到一定密度后,需要将细胞分成几部分转移至新的培养器皿,补充新的培养基,这一过程称为细胞传代。正常细胞的细胞系在体外培养时只能维持一定的时间期限,称为有限细胞系,有限细胞系在体外存活时间的长短,主要取决于细胞来源。中科博生。
体外细胞培养的过程,大致要经历原代培养期、传代期和衰退期3个阶段。
原代培养期 细胞自体内新鲜组织取出并在体外培养生长至第一次传代的时期,一般持续1〜4周。此期的细胞移动较活跃,但细胞分裂不旺盛。原代培养的细胞通常为异质性的群体,各细胞的遗传学形状各不相同,细胞互相依存在性强,核型为二倍体。原代培养的细胞与在体内的状态类似,更能代表其来源组织的细胞类型和组织特异性。中科博生。
传代期 原代培养的细胞生长至一定时间后,达到较高的密度,此时便应将原代细胞接种至其他的培养皿中,这个过程称为传代。原代培养细胞一经传代便称为细胞系。细胞传代数天或一周即可重复一次,传代期可持续数月。传代明的细胞增殖旺盛,保持二倍体核形,并保留原组织细胞的许多特征。细胞经长期反复传代后,将逐渐丧失其二倍体性质,至一定时间后(约在传达30〜50代后),细胞增殖变慢,进入衰退期。中科博生。
衰退期 此期细胞仍然生存,但增殖很慢或不增殖。细胞形态轮廓增强,最后衰退死亡。在少数情况下,在以上的某一阶段由于某种因素的作用,细胞发生转化可获得永生性。这样的细胞群体称为无限细胞系。