资讯动态

细胞冻存方法及注意事项(实用小技巧分享)

2022-10-07 10:39:54
|
访问量:115942

  细胞培养的开始,就是复苏细胞。如何有条不紊地让细胞从沉睡中苏醒?今天就来给大家总结几个实用小技巧,快点来get!

  细胞复苏流程:

  1、将冻存的细胞从液氮罐中取出,立即放入37°C的水浴中进行融化,轻柔晃动,加速融化,直到小瓶中只剩下一小块冰,时长应控制在1min中;

  2、用70%乙醇擦拭瓶外后转移无菌操作台中,打开瓶盖前,用酒精灯火焰对瓶口进行消毒;

  3、将预加热的新鲜完全培养基滴入小瓶中。缓慢用移液枪吸取瓶中液体至15ml离心管中,加入适量浓度和体积的完全培养基,轻柔混合均匀;

  4、200 × g左右细胞悬浮液离心5-10分钟。实际的离心速度和持续时间因细胞类型而异。弃掉上清,加入新鲜完全培养基重悬细胞,并将其转移到适当的培养容器和推荐的培养环境中。

细胞解冻流程图

  细胞解冻流程图

  注意事项:

  1、液氮温度低,小心低温对人造成的伤害,在液相中储存的冷冻瓶在解冻时存在爆炸的风险,因此,取出冻存管的时候,要做好个人防护。

  2、通常细胞集中储藏在液氮中,取出时应迅速,避免温差对其他冻存细胞造成影响。

  3、复苏细胞的核心技术,简而言之就是快融,将在37°C水浴中快速解冻冷冻细胞(< 1分钟。

  4、解冻时,冻存管先放入无菌一次性PE手套中,再放入水中融化,避免污染也方便操作。

  5、用预热过的培养基慢慢稀释解冻的细胞。

  6、解冻细胞后,在培养皿中培养时,应尽量维持高密度,以提高细胞存活率。

  7、注意无菌操作,避免细胞发生污染。

文章推荐
白细胞正常值参考范围是多少,如何正确读取白细胞计数结果?
2023-06-21
白细胞正常值怎么读?白细胞是人体免疫系统中的重要成分之一,它们负···
手把手教你做实验——免疫组化(免疫组化实验操作步骤)
2022-10-31
免疫组化,即免疫组织化学技术,是一项利用抗原抗体反应,通过使标记···
ELISA标本处理时要注意什么(ELISA实验操作注意事项)
2022-10-31
ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay酶联免疫吸附测定法)是免疫···
全自动细胞计数仪细胞计数的方法
2022-12-02
细胞培养中铺板的细胞浓度、确定细胞活力和评估细胞分离程序结果的一···
“疼痛”有了创新思路也能上Nature子刊!西安交大团队揭示慢性神经病理性疼痛中的ACC-VTA-ACC正反馈环路!
2024-12-20
“腰疼、腿疼、颈椎疼……”,长期伏案学习的生物医学科研人应该知道···
差异性分析方法都有哪些?这21种快速了解下
2024-12-18
在单样本均数比较、两样本均数比较、多样本均数比较、定类数据比较4种···
中科院1区TOP/IF17分!华中科技大学王世宣团队解锁卵巢衰老时空密码:FOXP1的关键性转录调控
2024-12-16
卵巢衰老的秘密,你知道么?女性在40岁以前出现卵巢功能减退的现象,···
中科院1区TOP/14.7分拿下!不愧是“铁死亡”+“慢阻肺”双强组合,直接一把命中Nature子刊!
2024-12-13
慢阻肺(COPD)是慢性阻塞性肺疾病的简称,一种以持续呼吸道症状和气···
  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×
留言咨询

感谢您的关注,如有需要请留言,我们会尽快和您联系!