资讯动态

紫外分光度法蛋白定量实验方法

2022-11-24 10:42:32
|
访问量:113942

  蛋白定量是蛋白质检测过程中的重要环节,检测的方法有很多,有Bradford检测法、Bradford斑点试验法、Coomassie 斑点试验法、紫外分光度检测法。其中、紫外分光度法是蛋白质定量方法中比较快的一种方法。

  一、紫外分光光度法进行蛋白定量的检测原理:

  由于蛋白质分子对于不同光度波段的吸光率也有所不同,所以紫外分光度检测法主要通过光系统来检测蛋白分子的吸光率,从而确定蛋白质的浓度进行的蛋白定量。比如205nm的光波波长主要吸光为肽链分子。280nm波长下色氨酸与酪氨酸吸光率则这两种分子以为主。

  二、蛋白定量中蛋白质溶液浓度的确定

  1、纯蛋白质溶液:

  a.在滤光波长为280nm的环境下对比其吸光率。

  b.其中的抗体和BSA,估算公式为:蛋白质 A280 (1mg/ml)IgG =1.35; IgM=1.2; BSA=0.7。(单位/吸光率约等于1mg/ml)

  2、蛋白定量中核苷酸类的蛋白溶液浓度测定:

  a.在280nm和260nm或205nm光波长环境下对照其吸光率;

  b.蛋白质浓度估算公式:

  280nm波长:蛋白质浓度(mg/ml)=(1.55×A280 )-(0.76×A260 )

  208nm波长:蛋白质浓度(mg/ml)= A205 /(27 + 120 A280/ A205 )

文章推荐
tunel细胞凋亡检测的原理和方法有哪些,如何进行tunel细胞凋亡检测
2023-10-14
细胞凋亡是一种重要的细胞死亡方式,在生物学研究以及临床诊断中具有···
T细胞增殖试验及其类型
2022-07-02
T细胞增殖试验的含义:T细胞增殖试验又称T细胞转化试验。T细胞在体外···
细胞周期检查点及其调节机制是怎样的
2022-11-10
细胞周期检查点:众所周知,细胞通常在体积翻倍时进行分裂,但实际上···
tunel法检测细胞凋亡结果如何分析,细胞凋亡结果分析方法及步骤详解
2023-10-14
TUNEL法是一种常用的细胞凋亡检测方法,其全称为“末端脱氧核苷酸末端···
新冠重大发现!哈佛医学院魏文毅团队等拿下中科院1区15.8分:揭示广谱抗冠状病毒新策略
2024-11-22
2019年新冠疫情爆发后,虽然时间转眼过去几年,但是它的遗留效应仍然···
超全汇总!这108种实验室常见的细胞系赶紧了解一下!
2024-11-20
在细胞培养中,我们常常会接触到各种各样的细胞类型,它们来源于不同···
浙江大学王青青团队拿下中科院1区21.8分的秘诀:揭示FXYD3在银屑病中的作用机制
2024-11-18
“做科研重在解决真问题”,相信这话对于很多科研学者来说,都是耳熟···
鼻炎真的能治好吗?中科院1区28.3分!上海交大李敏团队揭示过敏性鼻炎加重原因!
2024-11-15
鼻炎是一种异质性疾病,指的是鼻腔粘膜和粘膜下组织的炎症。它通过对···
  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×
留言咨询

感谢您的关注,如有需要请留言,我们会尽快和您联系!