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细胞复苏的准备及步骤

2023-03-04 10:28:44
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  细胞复苏是指从冷冻状态中重新使细胞恢复到正常生长状态的过程。以下是细胞复苏的准备及步骤:

  准备:

  确认需要复苏的细胞种类和来源。

  准备足够的培养基、血清和培养器材。

  确认复苏过程中所需的试剂、材料是否齐备。

  确认复苏操作区域清洁卫生,并采取必要的消毒措施。

  (1)物品的准备:

  超净工作台、酒精灯、废液缸、移液枪、培养瓶或培养皿、15ml离心管、培养基、离心管、二氧化碳培养箱、倒置显微镜、水浴锅、离心机等。

  (2)操作步骤:

  ①从液氮罐中取出冻存管。

  ②迅速放入37℃恒温水浴锅中,快速摇动冻存瓶,使细胞尽快解冻,约2-3分钟。

  ③剪开纱布口袋,取出冻存管,用75%酒精擦拭消毒后,净化台内打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入15ml离心管中,再补加2-3ml培养液,吹打使细胞悬浮。

  ④低速离心(800-1000rpm)离心5分钟。

  ⑤去除上清后,加入适量培养液重悬细胞后加入培养瓶中,摇匀后即可置于37℃恒温培养箱中培养,次日更换一次培养液后再继续培养。

  需要注意的是,不同种类和来源的细胞复苏步骤可能有所不同。因此,在进行细胞复苏前应仔细阅读相关文献或咨询专业人士。同时,在整个复苏过程中,要注意细胞的无菌操作和培养条件的控制,以确保细胞生长的稳定和健康。


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