细胞还没用胰酶消化,用PBS洗时,就有大量的细胞脱落下来,是怎么回事?
【参考答案】
细胞消化成团个人认为是和消化酶有关,消化酶是否保存不当(主要为温度)并且时间过长失去了消化活性(可以做酶活测定),或者酶的浓度配的不合适,在允许范围(防止消化过度损伤细胞)内适当加大酶液量。
关于第二个有大量细胞脱落,我想是没有做好及时的细胞传代,细胞汇合80%(理想)就应该进行传代,因为在培养过程中,培养基积累了大量的细胞代谢产物,导致培养基的成分,PH值发生变化,继续培养下去是有害的:营养成分不足+代谢产物堆积导致贴壁细胞脱落死亡,因此即便你没有进行传代前的消化作用,已经有部分死亡的细胞脱落下来了(应该是有定时做显微观察,染色鉴定死活)。