蛋白质沉淀与变性的关系
1、性质不同
蛋白质从溶液中析出的现象,称为蛋白质的沉淀。蛋白质的变性(denaturation),在某些物理和化学因素作用下,其特定的空间构象被破坏,即有序的空间结构变成无序的空间结构,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失,称为蛋白质的变性。
2、结果不同
蛋白质沉淀,破坏蛋白质分子的水化作用或者减弱分子间同性相斥作用的因子,使蛋白质在水中的溶解度降低而沉降下来转化为固体的分离方法。
蛋白质变性,蛋白质的变性不涉及一级结构的改变,蛋白质变性后,其溶解度降低、黏度增加,生物活性丧失,易被蛋白酶水解。若蛋白质变性程度较轻,去除变性因素后,有些蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能,称为复性。变性的蛋白质不一定发生沉淀,在一定条件下也可以使蛋白质不变性而沉淀(如盐析)。
3、方法不同
蛋白质沉淀常用的方法有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、生物碱试剂与某些酸(如三氯醋酸)沉淀等。能使蛋白质变性的化学方法有加强酸、强碱、重金属盐、尿素、丙酮等;能使蛋白质变性的物理方法有加热(高温)、紫外线及X射线照射、超声波、剧烈振荡或搅拌等。
如果蛋白质变性蛋白质溶液一定会产生沉淀,
如有机溶剂沉淀反应:蛋白质分子表面的水层失去,可致蛋白质变性,这与有机溶剂的浓度、与蛋白质接触的时间以及沉淀的温度有关,仍可控制条件制备有生物活性的蛋白质
加热沉淀反应:蛋白质变性凝固沉淀,这是加热灭菌的原理
重金属盐沉淀反应:蛋白质与重金属离子结合变性沉淀,临床上用牛奶抢救误食重金属的原理
生物碱试剂的沉淀反应;变性,
但是蛋白质溶液产生沉淀不一定是变性比如在蛋清溶液中加盐会有沉淀但是多加点水后沉淀消失。