1、无毒和无菌是体外培养细胞的要条件。为保，证细胞能在体外环境中生长繁殖,必须要确保无菌工作区域。
2、合适的温度:-般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37°C,不适宜的环境温度会影响细胞的生长。
3、适宜的渗透压:高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。
①CO2浓度精，确控制
②温度精，准控制
③满足细胞培养的湿度要求
水是细胞的重要组成部分,在培养箱中对细胞进行培养过程里，制冷或者制热直接的影响是细胞的培养基快速蒸发失水，蒸发将导致培养基上的渗透作用增强,产生渗透性脱水；培养基中盐浓度增加,细胞中水分跑出细胞外细胞收缩,新陈代谢变缓,细胞死亡。
培养箱内相对湿度的控制室非常重要的,饱和湿度环境可以避兔培养液中二氧化碳逃逸,保持pH值稳定,也能防止由于干燥使培养液中水分蒸发,渗透压升高,导致细胞培养失败。大多数的二氧化碳培养箱是通过增湿盘的蒸发作用产生湿气的,大型的二氧化碳培养箱是用蒸汽发生器或喷雾器来控制相对湿度水平的。－－些培养箱在底部设置湿度蓄水池,这样可以增强蒸发作用，但是,这个系统也更复杂,由于复杂结构的增加一些难以预料的问题也会在使用过程中出现。
④有效控制污染物
体外培养的细胞缺乏抗感染能力,所以防止污染是决定培养成功与否的要条件，因而需要操作过程中尽可能地保，证无菌。二氧化碳培养箱可应用不同的装置去减少和防止污染的发生,让用户具有多重灭菌选择。
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