细胞培养是细胞和分子生物学的主要工具之一,提供研究细胞正常生理学和生物化学的优秀模型系统(例如,代谢研究、衰老)、药物和有毒化合物对细胞的影响,突变和致癌。它还用于药物筛选和开发,以及大规模生产生物化合物(如疫苗、治疗性药物)match蛋白质)。在这些应用中使用细胞培养的主要优点是通过使用一批试验获得的结果的一致性和再现性克隆细胞。
培养基是细胞培养最重要的组成部分,因为它为细胞生长提供必要的营养、生长因子和激素,以及调节培养物的pH值和渗透压。虽然最初的细胞培养实验是使用从组织提取物和体液中获得的天然培养基进行的,但是实验的标准化、培养基质量稳定和需求的增加导致了化学合成的培养基的发展。目前合成的培养基分为:基础培养基、还原血清培养基和无血清培养基,它们的不同之处在于仍需要补充血清。血清是生长和粘附因子、激素、脂质的重要来源。以及用于在基础培养基中培养细胞的矿物质。此外,血清还调节细胞膜通透性,作为脂质、酶、微量营养素的载体,和微量元素进入细胞。在培养基中使用血清有许多优点;但是仍然有缺点不可避免包括成本高、标准化问题、特殊性、可变性以及刺激或抑制生长和/或细胞功能等有害影响,在某些细胞培养上,如果血清来源不好,则会造成污染也会对成功的细胞培养实验造成严重威胁。
在这低血清和无血清培养成为实验得力助手之一,他们大大的减少了培养细胞的成本。低血清培养基是目前很多实验室通用的培养细胞的方法之一。
其优点在于:
1. 减少血清在细胞污染中的概率;
2. 使实验具有重复性和一致性
3. 节约成本,低血清培养基含有细胞成长所需要的蛋白,一般使用常规的血清就能够养好细胞
缺点:
1. 增加了细胞培养基蛋白的检测;
2. 不同的细胞生长需要的蛋白,维生素,矿物质的含量和种类不同,增加了配制的难度
无血清培养基通过通过替代动物血清来避免使用动物血清的问题含适当营养和激素配方的蛋白。无血清培养基许多原代培养物和细胞系都有配方,如配方不当培养不合适的细胞,则细胞就会有营养不良的状态发生。
优点
•更一致的性能
•更易于净化和下游
•精确评估细胞功能
•提高生产力
•更好地控制细胞的新城代谢
缺点:
•成本高;
•增强对细胞培养基的检测
•不同的细胞所需的蛋白和氨基酸,维生素浓度和种类不一样 ,浓度过大或者添加不对会导致细胞变异或者活化,增加了配制的难度。