细胞复苏是将已经冻存的细胞恢复到生长状态,以供后续实验操作使用的一种方法。以下是细胞复苏的详细操作步骤:
细胞复苏的详细操作步骤
1. 提前打开水浴锅,将水温调至37℃,将需要用到的培养基放入水浴锅预热。
2. 复苏时,将冻存细胞放入水浴锅中快速摇晃使细胞在1~2min内迅速解冻。
3. 准备一只15ml离心管,加入5ml培养基,将解冻后的细胞悬液吸出放入到离心管内混匀,
盖上盖子,放入离心机内,1000rpm离心5min。
4. 离心完毕,用移液枪小心吸 去上清,加入1mL培养基重悬细胞。
5. 将细胞悬液转移至培养皿或培养瓶中,补充适量培养基,将细胞吹打均匀,置于37℃,5%CO2培养箱培养。
6. 这样我们就完成了细胞的复苏的流程,复苏后的细胞通常在24小时内会贴壁,第二天我们取出细胞便可以在显微镜下观察细胞的状态。