细胞冻存是一种重要的细胞保存方法，能够帮助科学家们永久保存细胞，以便未来的研究。本文将介绍细胞怎么冻存，包括细胞冻存的原理、冻存液的制备、冻存操作步骤、细胞解冻方法以及细胞冻存的注意事项等方面。

　　1. 细胞冻存的原理

　　细胞冻存是利用低温来阻止细胞的代谢活动，从而达到保存细胞的目的。当细胞被置于低温下时，细胞内的水分会逐渐减少，减少的水分会形成冰晶，这些冰晶会破坏细胞结构，导致细胞死亡。因此，为了避免这种情况的发生，细胞冻存时需要添加一些冻存液来保护细胞，使其能够在低温下存活。

　　2. 冻存液的制备

　　冻存液的组成因细胞类型不同而异。一般来说，冻存液中含有细胞培养基、血清、DMSO等成分。制备冻存液时需要注意，应该根据细胞类型、细胞密度及细胞培养基的配方等因素进行调配。一般情况下，冻存液中DMSO的浓度应该在5%~10%之间。

　　3. 冻存操作步骤

　　（1）细胞的收获

　　在进行细胞冻存之前，需要先将细胞从培养瓶中收获出来。此时需要注意，细胞的生长状态应该处于对数生长期，细胞密度应该适中。

　　（2）冻存液的添加

　　将制备好的冻存液加入细胞中，并轻轻地混合均匀，使细胞充分接触到冻存液。

　　（3）细胞的分装

　　将混合均匀的细胞分装到冻存管中。在分装过程中，应该尽可能地避免空气进入管中。

　　（4）细胞的冷冻

　　将分装好的细胞放入冷冻盒中，并迅速放入冰箱中进行冷冻。冷冻速度应该尽可能地快，以避免细胞因冻结过程中产生的压力而死亡。

　　4. 细胞解冻方法

　　（1）取出冻存管并立即放入恒温水中，直至完全解冻。

　　（2）将解冻的细胞转移到预先准备好的培养基中，并轻轻地混合均匀。

　　（3）将细胞培养在适合其生长的温度和CO2浓度下，直至细胞呈现出正常的生长状态。

　　5. 细胞冻存的注意事项

　　（1）细胞的冷冻速度应该尽可能地快。

　　（2）冻存液中DMSO的浓度应该控制在5%~10%之间。

　　（3）尽可能地避免空气进入冻存管中。

　　（4）细胞的解冻速度应该尽可能地慢。

　　（5）细胞的密度应该适中，不宜过于稠密或过于稀疏。

　　细胞冻存是一种重要的细胞保存方法，能够帮助科学家们永久保存细胞，以便未来的研究。在进行细胞冻存的过程中，需要注意冻存液的制备、冻存操作步骤以及细胞的解冻方法等方面，以保证冻存效果的良好。