在这篇文章中,我将列出最常用的抗生素来对抗细胞培养物的细菌污染。
当您意识到培养物被污染时,实际上防止进一步灾难的最佳和最安全的方法是丢弃受污染的细胞培养物。
然而,在某些情况下,保持培养物受到污染可能是绝对必要的,例如,如果它是不可替代的。
如果培养物被细菌污染,应使用抗生素来消除问题。
细胞培养中最常用的抗生素是青霉素/链霉素(pen/strep)、庆大霉素、卡那霉素和氨苄青霉素。
避免使用多种抗生素的混合物,因为在某种程度上,所有抗生素在培养基中都有轻微的毒性,并且太多一起使用会导致对细胞的累积毒性作用。
请记住,如果您长期使用抗生素,您可能会诱导形成无法消除的抗生素耐药菌落。
氨苄青霉素
它干扰细菌细胞壁合成的最后阶段
广谱,对革兰氏+和-革兰氏菌均有效
它必须储存在 2 到 8°C 的温度下。
它溶于水。
溶于水时必须保存在-20°C
我必须以 100 毫克/升的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 3 天。
氨苄青霉素以三种形式市售:无水、三水合物和氨苄青霉素钠盐。
无水氨苄青霉素和三水氨苄青霉素难溶于水(37℃蒸馏水中分别为10mg/ml和8mg/ml)。氨苄青霉素钠盐常用
于制备储备溶液,因为它具有更好
的水溶性(在水中> 50 mg / ml)。
氨苄青霉素原液
(100 mg/ml – 1000X 原液)
细胞培养氨苄青霉素必须与 PBS 一起制备。
在 15 ml Falcon 中称取 1 g 氨苄青霉素钠。
添加 9 mL 的 PBS。
通过涡旋混合直到所有氨苄青霉素完全溶解。
短暂离心以收集由于混合而沉积在 Falcon 的墙壁或盖子上的所有溶剂滴。
加入 PBS 至 10 ml 补足体积
使用 0.2 µm 或更小的多孔膜过滤器进行过滤。
保持无菌条件,分成小等份以保护溶液免受可能导致氨苄青霉素分解的反复冻融循环。
切勿对氨苄青霉素溶液进行高压灭菌,因为它会完全降解。
硫酸庆大霉素
它通过与核糖体的 30S 亚基结合来干扰细菌蛋白质的合成
广谱,对革兰氏+和-细菌均有效。对支原体也有效
它必须储存在 2 到 8°C 的温度下。
它溶于水。
溶于水时必须保存在-20°C
我必须以 50 mg / L 的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 5 天。
单硫酸卡那霉素
它通过与核糖体的 30S 亚基结合来干扰细菌蛋白质的合成
广谱,对革兰氏+和-细菌均有效。对支原体也有效
它必须在室温下储存。
它溶于水。
溶于水时必须保存在-20°C
我必须以 100 毫克/升的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 5 天。
青霉素-链霉素
青霉素对革兰氏+细菌有效,链霉素对革兰氏+和-细菌均有效
青霉素干扰细菌细胞壁合成的最后阶段,链霉素与30S亚基结合造成误读
它们可以单独以粉末形式购买,或者更好的是,存在含有适量两种抗生素的溶液。
青霉素必须有浓度100,000 U/L,链霉素100 mg/L。
它们溶于水。
青霉素可在室温下储存,链霉素在2-8°C之间
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 3 天。
除了这些是主要的之外,还有其他最终可用于根除细菌感染的抗菌剂
头孢噻吩
抑制细胞壁的合成
广谱,对革兰氏+和-细菌均有效。
它必须储存在 2-8°C。
它溶于水。
溶于水时必须保存在-20°C
我必须以 100 毫克/升的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 3 天。
双氢链霉素
它通过与核糖体的 30S 亚基结合来干扰细菌蛋白质的合成
广谱,对革兰氏+和-细菌均有效。
它必须储存在 2-8°C。
它溶于水。
溶于水时必须保存在-20°C
我必须以 100 毫克/升的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 5 天。
红霉素
它抑制转肽步骤的延伸
广谱,对革兰氏+和-细菌均有效。
它必须在室温下储存。
溶于 2N HCl 或乙醇。
溶解后必须保存在-20°C
我必须以 100 毫克/升的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 3 天。
盐酸林可霉素
它改变了细菌核糖体的 50S 亚基
仅对革兰氏+细菌有效。
它必须储存在 2-8 °C..
它是水溶性的。
溶解后必须保存在-20°C
我必须以 100 毫克/升的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 4 天。
硫酸新霉素
它导致错误编码并抑制起始和延伸
广谱,对革兰氏+和-细菌均有效。
它必须在室温下储存。
它是水溶性的。
溶解后必须保存在-20°C
我必须以 50 mg / L 的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 5 天。
多粘菌素 B 硫酸盐
它结合并干扰细菌细胞质膜的通透性
仅对革兰氏细菌有效。
它必须储存在 2-8°C。
它是水溶性的。
溶解后必须保存在-20°C
我必须以 50 mg / L 的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 5 天。
盐酸四环素
它通过阻断氨酰-tRNA 与 30S 亚基上的 A 位点的结合来抑制延伸
广谱,对革兰氏+和-细菌均有效。
它必须储存在-20°C。
它是水溶性的。
溶解后必须保存在-20°C
我必须以 10 mg / L 的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 4 天。
酒石酸泰乐菌素
它通过与 50S 亚基结合来干扰细菌蛋白质合成
对革兰氏+细菌和支原体有效。
它必须储存在 2-8°C。
它是水溶性的。
溶解后必须保存在-20°C
我必须以 8 mg / L 的浓度使用
在 37°C(因此在使用的培养基中)的稳定性为 3 天。