病毒是纳米级的试剂，尺寸大多小于 0.4 µm；需要电子显微镜来观察它们的纳米结构。然而，标准和超分辨率显微镜技术是强大且易于使用的工具，可用于了解病毒的更大规模结构和功能。

　　免疫荧光与多种成像方法兼容，包括标准宽场成像、共聚焦显微镜、终生成像和超分辨率显微镜[3-5]。选择使用哪个在很大程度上取决于特定的应用程序。

　　诊断

　　长期以来，广角显微镜的标准免疫荧光染色一直用于诊断病毒感染，例如来自患者鼻咽拭子的流感。针对病毒特异性蛋白的抗体用于对感兴趣的组织进行染色，临床医生可以快速确定样本中是否存在病毒。该程序缺乏更先进的分子方法的灵敏度；然而，它快速、简单且具有临床价值[6,7]。

　　感染机制

　　病毒的一个关键特征是它们必须进入宿主细胞才能繁殖并引起疾病。一旦它们附着在宿主细胞上，它们就会在内部释放它们的遗传物质。遗传物质被细胞识别和表达。然后编码的成分以多个副本存在，然后能够组装成新的病毒颗粒。这些新颗粒由细胞释放，可以继续感染新宿主。因此，病毒劫持宿主细胞机制以促进其致病作用。

　　能够理解这个复杂且高度可变的过程对于理解病毒的感染机制至关重要，尤其是像 SARS-Cov-2 这样的较新的病毒。例如，免疫荧光测定已被用于研究 SARS-Cov-2 与细胞表面受体的结合动力学[8]并研究其细胞内动力学，包括病毒颗粒如何在细胞内组装[9]。

　　对细胞功能的影响

　　除了检测病毒入侵的存在和揭示病毒入侵的动态外，我们了解感染的发病机制也至关重要。免疫荧光是这些研究的宝贵资产，因为能够可视化细胞反应对于了解病毒性疾病至关重要。这样的研究途径可能包括细胞应激反应对病毒感染的动力学[10]，以及病毒如何影响细胞和组织修复[11]。例如，一项研究表明，狂犬病病毒感染细胞可以促进细胞质应激颗粒的形成，这是一种由 mRNA 和蛋白质聚集体组成的无膜动态结构，可在细胞应激反应中迅速形成[10]. 研究人员使用徕卡共聚焦显微镜记录了免疫荧光染色细胞的图像。另一项研究表明，感染流感病毒 (IV) 的上皮干/祖细胞的修复严重依赖于成纤维细胞生长因子受体 2b (Fgfr2b) 信号传导[11]。一些免疫荧光染色细胞的图像是用徕卡正置显微镜拍摄的（参见图 1）。

　　治疗

　　最后，为了设计和提供安全有效的疗法和预防性疫苗，我们必须观察宿主细胞——以及它们与病毒的相互作用——如何受到治疗的影响。免疫荧光可用于测试抗病毒剂在细胞内的定位和行为[12]、抗体混合物的结合特性[13]，以及治疗对细胞内病毒颗粒存在和定位的影响。

　　结论

　　虽然分子研究是病毒学领域的重要工具，但显微镜为研究和临床应用提供了不可或缺的见解，有助于完成显示功能和结构之间关系的图片。免疫荧光测定通常是快速和直接的程序，使研究人员能够可视化病毒感染的影响和动态。在 COVID-19 大流行发生后的当前全球气候下，此类方法是预防和治疗这些病原体的关键工具。