载体构建(vectorconstruction)是把连接好的DNA分子运送到受体细胞中去。首先,必须寻找一种能进入细胞、在装载了外来的DNA片段后仍能照样复制的运载体。理想的运载体是质粒(plasmid),在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体。当给质粒插入一段外源DNA片段后,它依然能够进行自我复制。载体构建是分子生物学研究常用的手段之一。
浙江百越生物在载体构建上有丰富的经验,提供各种载体构建服务,包括常规的蛋白表达载体(大肠杆菌、酵母、昆虫、哺乳动物)的构建,报告基因载体,启动子、增强子等功能基因验证载体,miRNA、siRNA、shRNA功能验证载体、腺病毒包装载体、慢病毒包装载体等等。
实验步骤:
载体构建的简易步骤
(1)设计引物
(2)目的基因的克隆
(3)酶切目的基因和载体连接
(4)连接产物转化
(5)阳性克隆的筛选和检测
服务说明:
1.客户提供载体构建及改造所需的实验方案,目的基因产物及序列(如果目的基因不好制备),载体(如果本公司载体库里没有)及相关背景资料。
2.若客户只提供组织、细胞等样本,还需提供目的基因NCBI登录号,本公司将额外收取RNA提取及逆转录费用。
3.对于表达载体、报告基因载体以及病毒载体等的构建,您需要提供序列资料、希望克隆到的载体、酶切位点等资料;
4.对于本公司已有的载体和模版,免费提供。