细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象,在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。它在生物体的进化、内环境的稳定以及多个系统的发育中起着重要的作用。细胞凋亡不仅是一种特殊的细胞死亡类型,而且具有重要的生物学意义及复杂的分子生物学机制。
什么是早期凋亡?早期凋亡时发生了什么?
特征一:脂膜内侧外翻
检测工具:
Annexin 5细胞凋亡检测试剂盒,KTA0003
Annexin V细胞凋亡检测试剂盒,KTA0004
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期, PS由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35-36kD钙依赖性磷脂结合蛋白,与PS有高度亲和力,它通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V是检测细胞早期凋亡的灵敏指标。通常,使用一些荧光探针标记Annexin V,就可以简单直接地检测到PS外翻这一细胞凋亡的重要特征。
特质:
Abbkine砖利AbFlourTM系列特色荧光染料(蓝色、绿色、红色)标记重组人Annexin V蛋白,与PI搭配,推出不同荧光凋亡检测试剂盒,适用于用流式细胞仪、荧光显微镜等荧光设备的检测。
特征二:线粒体膜电位下降
正常线粒体膜电位是维持线粒体进行氧化磷酸化、产生ATP的前提,是维持线粒体功能所必需,线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件,JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位的理想荧光探针,线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物(J-aggregates),可以产生红色荧光(Ex/Em = 585/590),线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,此时JC-1为单体(monomer),可以产生绿色荧光(Ex/Em = 510/527 nm)。
特质:
Abbkine线粒体膜电位分析试剂盒(JC-1),以JC-1 为荧光探针,快速灵敏地检测线粒体膜电位的变化,此试剂盒可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。
什么是晚期凋亡?晚期凋亡时发生了什么?
细胞凋亡中, 尤其凋亡晚期,染色体DNA会发生断裂,产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧尿苷三磷酸核苷酸(dUTP)和荧光素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,即脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)。正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,很少能够被染色。由此,TUNEL是检测细胞凋亡后期DN**段化的*常用方法。
检测工具:橙光TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒,KTA20111
特质:
Abbkine的TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒提供实验所需的全套试剂组分以及优化的实验方案,适用于荧光酶标仪、荧光显微镜、流式细胞仪等多种仪器,可用于检测贴壁细胞,悬浮细胞,石蜡包埋组织切片,冰冻切片等多种样品类型。
细胞凋亡一旦开始便无法停止,它是一个高度调控的过程。
细胞凋亡可通过两种起始途径启动,内始式途径由非受体刺激激活,如DNA损伤、内质网应激、代谢应激,线粒体外膜通透性改变,如细胞色素c释放,外源途径通过死亡受体与配体结合(如FasL,肿瘤坏死因子TNF)开始。
比色法 Caspase-3 活性分析试剂盒 ,KTA3022
此后,这两种途径都汇合于caspase级联反应,通过激活caspase蛋白酶或降解蛋白质的酶来诱导细胞死亡。抗凋亡配体,如细胞因子,生长因子,通过不同的信号分子如AKT和p90RSK和抗凋亡蛋白,如Bcl-2和Bcl-x促进细胞的存活、增殖和分化。这些细胞因子和生长因子的退出导致细胞死亡。