摘要   实验后对动物尸体进行检验和处理,是动物实验中的一个重要工作内容。通过对实验动物进行解剖观察,分析其死亡原因,并对动物实验结果进行判定。

　　( 一 ) 实验动物尸体剖检方法

　　实验动物处死后0.5h内必须进行尸体解剖,并应先取出胸腔脏器、后取出腹腔脏器进行检查。而头部器官的解剖检查可先、可后进行。这样安排便于保持各脏器之间的联系,便于观察各脏器病变之间的关系。实验动物尸体的具体检查方法如下:

　　1. 体表检查

　　首先复查实验动物编号、性别及实验动物分组,记录死亡或活杀时间与解剖时间;随之检查实验动物的外形,包括年龄、毛色、皮肤出血以及器官的病变情况;有无尸冷、尸僵、腐败现象,对判断实验动物的死亡时间有重要意义。

　　尸僵在实验动物死亡后1h自头部开始,最先从下颌骨开始,继而在颈部肌肉,随之为胸及腹部肌肉,再次为上肢,最后到下肢,尸僵一般持续约12h,24h 左右逐渐消失。弛解的顺序也是如此。所以,根据尸僵存在的部位可以推测出实验动物死亡后经过的时间。如果实验动物急性死亡,则尸僵出现较早,僵直程度较强,持续时间也较长。尸僵还受周围环境温度的影响。

　　2. 胸腹部皮下组织检查

　　把实验动物固定于解剖台上,用纱布蘸少量来苏尔液湿润被毛。从下颁骨至耻骨联合处沿正中线切开皮肤,剥离皮下组织,观察皮下组织是否有出血和感染情况。分离出气管,用大号止血钳将气管夹住,以便于剖胸时观察肺。再自胸部中线起剥离胸部的皮下组织和胸大肌进行检查。

　　3. 腹腔检查

　　沿肋骨下缘腹正中切开腹壁肌肉至耻骨联合处,为防止切破腹腔脏器,切开时用力不要过猛。从耻骨下端向脊柱方向,把两侧皮肤剪开,以便于观察腹腔脏器。切开腹腔时,要注意腹腔内有无积液、血液或炎性渗出物。随后检查腹腔内各脏器位置是否正常,尤其要注意检查肝脏、脾脏的位置及其大小、膀脱的胀满程度、胃肠的充盈情况以及大网膜和腹壁的颜色及状态。

　　4. 胸腔检查

　　检查腹腔后,再切开胸腔。用剪刀或软骨刀,在肋骨的软硬骨连接线内侧约1cm处,从肋弓到第二肋骨,将左右肋骨切断,与肋骨软骨连接处略成平行。此时应注意刀尖勿把肺组织切破,剪时应尽量贴着胸内壁。切开肋骨后将肋弓提起。为防止损伤大血管,导致血液流人胸腔而误认为是胸腔积液,此时不要急于剪断胸锁关节。暴露胸腔后,先观察胸腔内各脏器的位置以及彼此关系,再检查两肺表面与胸壁是否粘连、胸膜颜色和状态、心包情况、纵隔有无出血等。

　　检查胸骨髓的情况:用剪刀将胸骨两边的肋软骨去掉,并将胸骨周围肌肉剥离干净。取第三或第四节胸骨时,一端用纱布包住,以左手夹紧,放在手术台上,用刀将胸骨切开,检查锵骨髓颜色及湿润程度。

　　5. 胸腔内器官的取出和剖检

　　用尖刀自颈部切口插入下领骨正中的内侧缘,将沿下颌骨间的组织联系分开。随后一手用组织钳自切口伸入口腔内夹住舌尖,并将舌向下拉出口腔,以暴露软硬腭,另一手执刀,在软硬腭交界处把软腭剪断,再将咽后壁剪断。这样,便将舌、扁桃体、软腭、咽部组织与口腔壁及咽壁分离。再将气管及食道等与组织及脊柱相连的部分分离,直达胸腔上口为止。在胸腔入口处切断锁骨下动脉及颈总动脉,将口腔及颈部器官连同心肺一起向下拉,使胸腔器官与脊柱相连的软组织互相分离,直达横膈为止。用止血钳在横膈的胸腔侧夹住主动脉、下腔静脉及食管。在夹住的上端剪断,即可将上消化道(舌、扁桃体、咽、食道 )、上呼吸道(喉、气管和支气管)连同心脏及肺脏一起取出并分别检查。

　　上消化道检查:先检查舌黏膜是否出血和溃疡;咽部有无出血和炎性渗出物;两侧扁桃体表面有无出血和炎性渗出物。然后自上而下剪开食管后壁,检查黏膜膜有无出血和泡沫样、胆汁状物质。

　　6. 腹腔内器官的取出和剖检

　　将实验动物仰卧位固定。由横膈处切断食道,由骨盆切断直肠,将胃、肠、肝脏、胰腺、脾脏一起取出并分别检查。也可按照脾脏、胃、肠、肾脏、肝脏、膀胱、生殖器官的次序分别取出。取脾脏时,一手用镊子将脾脏轻轻提起,一手持剪刀剪断韧带;取胰腺时,将胰腺与周围的脂肪组织一同取出,浸入10%的甲醛中,灰白色的是胰腺组织;取胃肠时,将食道与贲门部做双绷结扎后中间剪断。首先用镊子提起胃贲门部并切断靠近贲门的食道。一边牵拉,一边切断周围韧带,使胃同周围组织分离,然后按照十二指肠、空肠、回肠的顺序切断肠管的肠系膜根部,胃肠从腹腔取出;取肾脏时,将肾脏周围的脂肪剥离后取出;取肝脏时,用镊子夹住肝门静脉的根部,切断血管与韧带,然后取出;取出膀胱与生殖器官时,不要损伤膀胱及生殖器官,沿根部切断即可。

　　7. 实验动物尸检后标本数

　　每只动物尸体检查后,常规采取标本的部位和数目见表 4-5-19。

　　组织标本取材的一般原则是:最好在动物死亡后立即剖检,并采集标本,以免发生组织自溶现象和其他变化;组织块的厚度为0.2～0.3cm;面积为1～1.5cm2,最多不超过 2cm2,过大、过厚的组织块常常固定不好;对于冷冻切片,取材组织块可略厚(0.3～0.4cm）用于免疫组织化学染色的组织块,以 1cm×1cm×0.2cm为好,不要太大,以免浪费试剂;对于皮肤、腔道器官及囊壁组织应剪成细条,较长时可将其缠绕成同心圆状,同时应将其贴在易吸水的(如草纸、滤纸、纱布)片上固定,以免在固定液中发生弯曲或扭转变形;骨组织需要先经过脱钙处理;新鲜组织若需要保存,应将其所取组织用锡箔纸包好,放入液氮速冻,然后置于-70 ℃冰箱中;在成对器官(如肾)切取组织或在同一器官切取多块组织时,要把组织切成不同的形状,以免混淆。例如将左肾切成长方形或三角形,而右肾切成正方形。

　　取材时应注意防止人为因素的影响,如取材时应用锋利的刀、剪,避免用钝刀前后拉动或用力挤压组织。应避免使用有齿镊,同时夹取组织时动作应轻柔,不宜过度用力,以免挫伤或挤压组织,从而引起组织结构的变形。取材时还应避免过多的坏死组织或凝血块,如有线结应 拔除线结。组织有钙化时,应脱钙后再取材。组织上如有血液、黏液、粪便及污物,应先用水冲洗干净后再取材。肿瘤标本的取材,应先选择肿瘤主体部分、肿瘤邻近组织及其肿瘤两端的边缘分别取材,并应注意切取肿瘤组织及正常组织的交界处。

　　( 二 ) 实验动物尸体的处置

　　对实验动物尸体的处理是动物实验中不可忽视的一项工作内容。正确处理动物实验后的动物尸体,对保证人畜安全、保护环境生态有重要意义。

　　(1)凡是有条件的机构,均应建造实验动物尸体或脏器的焚烧炉。如果没有条件建立,则应委托有焚烧炉的机构处理好动物尸体,这对于保护环境是十分重要的。

　　(2)对确诊为人畜共患病、急性或烈性传染病的动物尸体,一方面应立即用棉花堵住尸体的天然孔并消毒尸体表面,另一方面对被污染的场地及器械进行严格消毒。剖检完毕后,应立即对动物尸体、垫料和被污染的物品喷洒消毒液后,将尸体或污染物装入袋中集中焚毁或高压消毒。附着于器械及衣物的版汁和血液等,要使用消毒液充分消毒,然后再用清水洗净,擦干晾晒,乳胶手套经清洗、消毒、擦干后,撒上滑石粉,然后脱下。最后对剖检场地彻底消毒处理。

　　(3)对非病原微生物感染试验的动物尸体,可置放于冰柜中暂存,然后集中焚毁。

　　(4)对做止血、放血、创伤、血压、呼吸等急性实验的猪、犬、绵羊、兔等较大的实验动物,即使在实验过程中没有注射有毒物质,其个体也不能供人类食用,但一般可以供教学训练用或喂药试验用。禁止把实验动物的尸体或脏器组织倒入垃圾箱中随意处理。