资讯动态

原代细胞实验如何检测

2022-06-30 10:26:03
|
访问量:114472

  (一)包涵体的检测。

  1. 血片及白细胞涂片制备

  采集的抗凝血标本尽快用血球层推血片,待干燥后冷丙酮固定10min;或提取抗凝血中的白细胞并进行涂片,待干燥后冷丙酮固定10min。

  2. 染色

  通常采用瑞氏(Wright)染色法、姬氏(Giemsa)染色法及瑞-姬混合染色法。有条件的实验室,可使用美国CDC推荐的染色方法。

  3. 染液配置方法

  (1)瑞-姬染液:取瑞氏染料和姬氏染料各0.5 g,以甲醇研溶,加甲醇500ml保存,每天摇匀1次,1周后可使用。

  (2)改良Mc Donald法瑞-姬染色剂:75 ml甘油(分析纯)中加入磷酸盐缓冲液(Na2HPO4 1g和KH2PO4 2g),以4 ml蒸馏水溶解,37 ℃水浴24 h溶解混匀,用滤纸过滤,保存于密封的棕色瓶中备用。上述甘油缓冲液1.5 ml加瑞-姬染色剂50 ml,混匀后备用。

  4. 染色步骤

  血推片或白细胞涂片分别以两种染色剂染色2 min,再加蒸馏水作用5 min,用自来水冲洗。

  5. 结果观察

  中性粒细胞中可见桑葚状包涵体(见图1),并注意保存相关标本,以便进行复核。

  (二)血清学检测。

  常用血清学方法为间接免疫荧光(IFA)法。采集急性期(发热初期,一般发病1周内)与恢复期(至少间隔2-3周)双份血清。如恢复期血清抗体检测阴性,应建议医生采集第3份血液样本(间隔2-4周)。

  1. 试剂

  使用推荐的、经过ISO质量认证的产品。

  2. 方法及操作按说明书进行。

  3. 结果解释

  IFA检测结果解释按说明书进行。

  如果同时检测双份血清,IgG抗体4倍升高,则结果强烈支持原代细胞无形体感染。如果急性期抗体升高,而恢复期没有升高或轻微升高,则应采集第3份血液样本(间隔2-4周)进行进一步检测。

文章推荐
细胞瞬时转染步骤、原理
2023-02-21
哺乳动物细胞瞬时转染能在短期内快速表达高活性蛋白而被广泛应用。本···
什么是PCR,PCR应该了解的知识与实验出现问题的解决办法
2022-07-20
PCR是生物领域中最基础,也是尤为重要的一环今天给大家讲述一些PCR应···
gfp融合蛋白载体构建(附GFP的优缺点及改进方法讲解)
2023-05-11
GFP(绿色荧光蛋白)是从水母体内发现的发光蛋白,分子质量为26kDa,···
荧光定量PCR原理,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的两种方法
2022-07-13
荧光定量PCR原理荧光定量PCR技术,是指在普通PCR技术的基础上,在PCR···
新冠重大发现!哈佛医学院魏文毅团队等拿下中科院1区15.8分:揭示广谱抗冠状病毒新策略
2024-11-22
2019年新冠疫情爆发后,虽然时间转眼过去几年,但是它的遗留效应仍然···
超全汇总!这108种实验室常见的细胞系赶紧了解一下!
2024-11-20
在细胞培养中,我们常常会接触到各种各样的细胞类型,它们来源于不同···
浙江大学王青青团队拿下中科院1区21.8分的秘诀:揭示FXYD3在银屑病中的作用机制
2024-11-18
“做科研重在解决真问题”,相信这话对于很多科研学者来说,都是耳熟···
鼻炎真的能治好吗?中科院1区28.3分!上海交大李敏团队揭示过敏性鼻炎加重原因!
2024-11-15
鼻炎是一种异质性疾病,指的是鼻腔粘膜和粘膜下组织的炎症。它通过对···
  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×
留言咨询

感谢您的关注,如有需要请留言,我们会尽快和您联系!