资讯动态

原代细胞实验如何检测

2022-06-30 10:26:03
|
访问量:114922

  (一)包涵体的检测。

  1. 血片及白细胞涂片制备

  采集的抗凝血标本尽快用血球层推血片,待干燥后冷丙酮固定10min;或提取抗凝血中的白细胞并进行涂片,待干燥后冷丙酮固定10min。

  2. 染色

  通常采用瑞氏(Wright)染色法、姬氏(Giemsa)染色法及瑞-姬混合染色法。有条件的实验室,可使用美国CDC推荐的染色方法。

  3. 染液配置方法

  (1)瑞-姬染液:取瑞氏染料和姬氏染料各0.5 g,以甲醇研溶,加甲醇500ml保存,每天摇匀1次,1周后可使用。

  (2)改良Mc Donald法瑞-姬染色剂:75 ml甘油(分析纯)中加入磷酸盐缓冲液(Na2HPO4 1g和KH2PO4 2g),以4 ml蒸馏水溶解,37 ℃水浴24 h溶解混匀,用滤纸过滤,保存于密封的棕色瓶中备用。上述甘油缓冲液1.5 ml加瑞-姬染色剂50 ml,混匀后备用。

  4. 染色步骤

  血推片或白细胞涂片分别以两种染色剂染色2 min,再加蒸馏水作用5 min,用自来水冲洗。

  5. 结果观察

  中性粒细胞中可见桑葚状包涵体(见图1),并注意保存相关标本,以便进行复核。

  (二)血清学检测。

  常用血清学方法为间接免疫荧光(IFA)法。采集急性期(发热初期,一般发病1周内)与恢复期(至少间隔2-3周)双份血清。如恢复期血清抗体检测阴性,应建议医生采集第3份血液样本(间隔2-4周)。

  1. 试剂

  使用推荐的、经过ISO质量认证的产品。

  2. 方法及操作按说明书进行。

  3. 结果解释

  IFA检测结果解释按说明书进行。

  如果同时检测双份血清,IgG抗体4倍升高,则结果强烈支持原代细胞无形体感染。如果急性期抗体升高,而恢复期没有升高或轻微升高,则应采集第3份血液样本(间隔2-4周)进行进一步检测。

文章推荐
细胞划痕实验详细步骤(细胞迁移入门之划痕实验)
2022-10-12
细胞划痕实验大概是最简单的分析细胞迁移能力的试验了,但是,你以为···
细胞凋亡是基因控制的吗(探讨细胞凋亡的调控机制)
2023-09-08
细胞凋亡是一种重要的细胞死亡方式,它在发育、组织修复和免疫防御中···
提原代细胞老是被污染(如何解决原代细胞污染问题)
2023-09-22
细胞培养在生物学研究中起着至关重要的作用,然而,提原代细胞在培养···
细胞转染后划痕实验怎么做(细胞转染后如何进行划痕实验)
2023-07-01
细胞转染后划痕实验是一种常见的生物学实验方法,主要用于研究细胞迁···
“疼痛”有了创新思路也能上Nature子刊!西安交大团队揭示慢性神经病理性疼痛中的ACC-VTA-ACC正反馈环路!
2024-12-20
“腰疼、腿疼、颈椎疼……”,长期伏案学习的生物医学科研人应该知道···
差异性分析方法都有哪些?这21种快速了解下
2024-12-18
在单样本均数比较、两样本均数比较、多样本均数比较、定类数据比较4种···
中科院1区TOP/IF17分!华中科技大学王世宣团队解锁卵巢衰老时空密码:FOXP1的关键性转录调控
2024-12-16
卵巢衰老的秘密,你知道么?女性在40岁以前出现卵巢功能减退的现象,···
中科院1区TOP/14.7分拿下!不愧是“铁死亡”+“慢阻肺”双强组合,直接一把命中Nature子刊!
2024-12-13
慢阻肺(COPD)是慢性阻塞性肺疾病的简称,一种以持续呼吸道症状和气···
  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×
留言咨询

感谢您的关注,如有需要请留言,我们会尽快和您联系!