资讯动态

蛋白提取纯化有什么注意事项(需要牢记)

2022-08-20 10:41:30
|
访问量:128612

  在进行任何一种蛋白质纯化的时候,都要时刻注意维护它的稳定性,保护它的活性,有一些通用的注意事项需要牢记,它们包括:

  1、操作尽可能置于冰上或者在冷库内进行。

  2、不要太稀,蛋白浓度维持在μg/mL~mg/mL。

  3、合适的pH,除非是进行聚焦层析,所使用的缓冲溶液pH避免与pI相同,防止蛋白质的沉淀。

  4、使用蛋白酶抑制剂,防止蛋白酶对目标蛋白的降解;在纯化细胞中的蛋白质时,加入DNA酶,降解DNA,防止DNA对蛋白的污染。

  5、避免样品反复冻融和剧烈搅动,以防蛋白质的变性。

  6、缓冲溶液成分尽量模拟细胞内环境。

  7、在缓冲溶液中加入0.1~1mmol/LDTT(二硫苏糖醇)(或β-巯基乙醇),防止蛋白质的氧化。

  8、加1~10mmol/LEDTA金属螯合剂,防止重金属对目标蛋白的破坏。

  9、使用灭菌溶液,防止微生物生长。


文章推荐
细胞实验:流式细胞凋亡原理
2021-08-20
其原理主要是根据 细胞凋亡 时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特···
细胞增殖检测方法有哪些
2023-05-15
细胞增殖检测的应用相当广泛,不论是测试药物试剂还是生长因子的效果···
皮肤癌动物模型,有关皮肤癌动物模型实验研究
2022-05-16
皮肤肿瘤(skin tumor)是发生在皮肤的细胞增生性疾病,临床上有良性···
细胞耐药实验怎么做(详细介绍细胞耐药实验步骤和注意事项)
2023-10-12
细胞耐药实验是研究肿瘤细胞耐药性的常用方法之一,其通过模拟体内环···
狂斩1区37.8!且看南京医科大学季勇团队巧妙的硫巯基化课题思路!不信你学不会!
2024-10-29
大家好,在上一篇中我们通过一篇高分文献讲解了关于线粒体自噬的相关···
文献中的DCA曲线怎么看?!1分钟详解!
2024-10-25
在临床预测模型的评估中,DCA曲线是一种非常重要的工具,可以帮助我们···
中科院1区,IF=11.4!中山大学刘海英团队揭示YTHDC1延缓细胞衰老的重要机制!
2024-10-22
细胞衰老是对许多不同的触发因素的反应,包括DNA损伤、端粒功能障碍、···
顶刊一区15.1!且看杜克大学王小凡团队带来的“支链氨基酸代谢+衰老”王炸组合!打开课题新思路(附技术路线)
2024-10-22
近年来,支链氨基酸代谢及其调控由于其广泛且深刻的疾病关联性,成为···
  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×
留言咨询

感谢您的关注,如有需要请留言,我们会尽快和您联系!