摘要：

　　文题释义：

　　微管相关蛋白：是细胞内存在的与微管结合的一种蛋白质，主要包括微管相关蛋白1、微管相关蛋白2、Tau和微管相关蛋白4等，前3种蛋白主要存在于神经元中，而微管相关蛋白4存在于各种细胞中。

　　胶质纤维酸性蛋白：是一种中间丝蛋白，分子质量为56 kD，主要存在于中枢神经系统的星形胶质细胞内，可作为一种特异性标志物用于鉴定星形胶质细胞。

　　背景：培养神经元的质量是研究中枢神经系统疾病的关键所在，但培养方法一直没有统一的标准。

　　目的：探究取材部位及阿糖胞苷处理对原代培养神经元活性、纯度及成熟度的影响。

　　方法：选取新生24 h内的SD乳鼠，取大脑皮质表面2.0-3.0 mm处细胞，培养后24，48，72 h，用5 μmol/L或10 μmol/L阿糖胞苷处理48 h；另取全部大脑皮质细胞，培养后48 h用5 μmol/L阿糖胞苷处理48 h。培养至第7天，倒置显微镜下观察细胞形态，采用CCK-8法检测阿糖胞苷对神经元活性的影响，免疫荧光和Western blot检测神经元的纯度及成熟度。

　　结果与结论：①倒置显微镜：10 μmol/L 阿糖胞苷24，48，72 h组神经元密度分别低于同时间下的5 μmol/L阿糖胞苷组，该6组神经元突起相互之间均可连接成紧密的网状结构，神经元胞体丰满并充满折光特性；全皮质组细胞密度低于正常对照组，并可明显观察到非神经元；②CCK-8检测：各阿糖胞苷组细胞活性均低于正常对照组(P < 0.001)， 10 μmol/L 阿糖胞苷24，48，72 h组神经元活性低于同时间下的5 μmol/L阿糖胞苷组(P < 0.05)，5 μmol/L 阿糖胞苷24 h组神经元活性低于 5 μmol/L 阿糖胞苷48，72 h组(P < 0.01)；③免疫荧光染色：各阿糖胞苷组神经元纯度大于正常对照组、全部皮质组(P < 0.001)，各阿糖胞苷组神经元纯度无差异；④Western blot检测神经元特异性烯醇化酶蛋白表达：各阿糖胞苷组神经元成熟度高于正常对照组(P < 0.05)，其中以 5 μmol/L 阿糖胞苷48 h组成熟度最高；⑤结果表明：取新生24 h内大鼠大脑皮质表面2.0-3.0 mm处皮质，培养后48 h加入5 μmol/L 阿糖胞苷处理得到的神经元活性、成熟度和纯度较好。

　　https://orcid.org/0000-0003-2938-2738(王京)

　　中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程

　　关键词: 阿糖胞苷, 大脑皮质, 神经元, 原代培养, 神经元活性, 大鼠

　　引用本文: 王 京, 卢思彤, 吴印林, 刘玉东, 邹维艳, 孙美群. 新生SD大鼠大脑皮质神经元的原代培养及鉴定[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(15): 2344-2349.