资讯动态

PCR实验怎么做(聚合酶链式反应实验操作步骤)

2022-10-31 10:33:55
|
访问量:113672

  PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程,这一过程可以看作是生物体外的特殊DNA复制,能快速特异地在体外扩增任何目的DNA,可用于基因分离克隆、序列分析、基因表达调控、基因多态性研究等许多方面。

  下面我们就来了解一下PCR的具体操作步骤吧~

   操作步骤  

  01提取RNA

  取适量的动植物组织或培养细胞,加入适量的RNAiso Plus后匀浆,室温静置5min

  4℃ 12000rmp离心5min,取上清

  加入1/5 RNAiso Plus体积量的氯仿,振荡混匀,室温静置5min

  4℃ 12000rmp离心15min,取上清

  加入 0.5-1倍RNAiso Plus体积量的异丙醇和适量的核酸助沉剂,振荡混匀,室温静置10min

  4℃ 12000rmp离心10min,弃上清保留沉淀

  用与RNAiso Plus等量的75%无水乙醇清洗沉淀

  4℃ 7500rmp离心5min,弃上清保留沉淀,开盖晾干3min

  加适量的DEPC水溶解沉淀,轻吹混匀

图例

  02逆转录

  逆转录采取20ul体系进行,使用Bio-Rad设备

  03扩增

  扩增采取50ul体系进行,使用Bio-Rad设备

图例

  04琼脂糖电泳


文章推荐
细胞实验怎么建立细胞模型(如何做细胞模型)
2023-06-02
在生物学研究中,细胞是一个非常重要的研究对象。细胞模型的建立可以···
细胞培养诊断和避免细胞死亡方法(避免细胞死亡)
2023-04-04
对于细胞死亡,找到这一问题的根源可能非常具有挑战性,而且会耗费大···
细胞实验中药物配制原理详解,常用细胞实验药物配方推荐
2023-06-25
细胞实验是药物研发中不可或缺的一环。本文将从细胞实验的基本原理、···
细胞实验怎么稀释样品(如何把细胞稀释到想要的浓度)
2023-07-09
细胞实验是生命科学中非常重要的一部分,而在进行细胞实验时,样品的···
“疼痛”有了创新思路也能上Nature子刊!西安交大团队揭示慢性神经病理性疼痛中的ACC-VTA-ACC正反馈环路!
2024-12-20
“腰疼、腿疼、颈椎疼……”,长期伏案学习的生物医学科研人应该知道···
差异性分析方法都有哪些?这21种快速了解下
2024-12-18
在单样本均数比较、两样本均数比较、多样本均数比较、定类数据比较4种···
中科院1区TOP/IF17分!华中科技大学王世宣团队解锁卵巢衰老时空密码:FOXP1的关键性转录调控
2024-12-16
卵巢衰老的秘密,你知道么?女性在40岁以前出现卵巢功能减退的现象,···
中科院1区TOP/14.7分拿下!不愧是“铁死亡”+“慢阻肺”双强组合,直接一把命中Nature子刊!
2024-12-13
慢阻肺(COPD)是慢性阻塞性肺疾病的简称,一种以持续呼吸道症状和气···
  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×
留言咨询

感谢您的关注,如有需要请留言,我们会尽快和您联系!