现在，病毒性疫苗工业有了很大的发展，包括人用和兽用疫苗。在品控上，我国药典有详细的规定。其中，规定了生产用细胞的培养上清、病毒收获液、检定细胞等不得含有支原体。

　　对于珍贵的病毒收获液，如何发现有支原体存在，是否可以清除呢？传统有采用抗生素的方法，但它只是对支原体产生抑制，并不能持久的成功的祛除，下面可以给您提供一种方法，它可以真正杀死支原体，并且只需处理一次即可。它是采用生物物理学的方法，不会导致支原体耐药株，处理后也容易再祛除。

　　这便是采用Mynox®。Mynox®是全球惟一一款直接杀除支原体的试剂。它来自枯草杆菌提取物，可特异性地与支原体膜结合，改变支原体膜通透性，从而使支原体在2-3小时内破溃死亡。

　　下面介绍具体操作方法：

　　一、对于无包膜的病毒，支原体去除流程如下：

　　注意：冻存或新鲜的不含细胞和细胞碎片的病毒悬浮液可进行支原体杀除。病毒的滴度不影响去除效果，

　　1. 在1.5ml无菌并带有安全密封性的反应管中，加入1ml不含胎牛血清的细胞培养基和100 µl Mynox®并混合。

　　2. 将125 µl 病毒液（胎牛血清如含有，其浓度不要高于8%）加入到上述混合液中。注意：混合液应浸湿反应管的所有内表面。

　　3. 室温静置2小时，并轻轻摇匀。

　　4. 加入细胞培养基，使Mynox®稀释10倍，以终止反应。这一步可通过将混合液加入到待扩增培养的细胞培养物中，同时对病毒进行繁殖。终体积应为混合液体积的10倍。

　　注意：

　　待扩增培养的细胞培养物要先检测一下是否有支原体污染。

　　二、对于包膜病毒，支原体的去除流程如下：

　　包膜病毒外层的膜成分与支原体膜相似，也和Mynox®结合。这些病毒也容易被Mynox®灭活，具体依据Mynox®的浓度和作用时间。为保证去除支原体后的病毒液能用于进一步的繁殖，病毒的初始滴度应高于106 TCID50。

　　注意：冻存或新鲜的不含细胞和细胞碎片的病毒悬液均可进行支原体杀除。

　　1. 在15ml无菌带旋盖的反应管中，加入4.4ml不含胎牛血清的细胞培养基。加入Mynox 100 µl，并混合。

　　2. 将0.5 ml病毒液（如含有胎牛血清，最高浓度要不高于8%）加入到上述混合液中。以上总体积为5 ml。

　　注意：混合液应浸湿反应管的所有内表面。

　　3. 室温静置30min，并轻轻摇匀。

　　4. 加入细胞培养基，使Mynox®稀释10倍，以终止反应。这一步可通过将混合液加入到待扩增培养的细胞培养物中，同时对病毒进行繁殖。终体积应为混合液体积的10倍。

　　注意：

　　待扩增培养的细胞培养物首先要检测是否有支原体污染。

　　这个支原体去除过程，可多次用于病毒收获液中的支原体杀除，以确保所有支原体已祛除。