在细胞转染实验中,我们常常要根据不同的实验目的,转染细胞的不同,选择我们将要使用的实验方法。
脂质体介导的转染是我们的首先选择,他具有易操作,重复性好,低毒性和适用于悬浮培养体系细胞的特点,在很多转染方法效率低的情况下,脂质体转染方法效果很好。
其中,脂质介导转染试剂的典型,非脂质体型FuGENE6和阳离子脂质体Lipofectamine2000能够在有血清的干扰下成功转染细胞,减少转染的操作步骤。
脂质体介导转染的原理主要是通过静电作用,将带有负电荷的DNA与阳离子脂质结合,形成脂质-DNA复合体。这样的复合体较为稳定,能够延缓核酸酶的降解作用。
脂质-DNA复合体通过细胞膜的融合,或细胞的内吞作用,进入到细胞中。
脂质介导法转染除了基因片段,还可以运载大质粒。除了瞬时转染,也可以用于建立稳定表达的细胞系。
因此,在其他转染方法效率低的情况下,可以使用脂质体转染方法。针对原代细胞或分化细胞,或者转染大质粒等高分子质量DNA时,也推荐使用脂质体介导转染。