培养基实验有哪些值得注意的小技巧呢,一起来看看吧!
一、添加剂的添加
1.温度的掌握:卵黄和抗生素类添加的温度都不应太高。
2.定量:过多会抑制一些目标菌,太少又导致杂菌的过度生长。
二、培养温度的掌握
1.真菌类:25-28℃培养
2.细菌类:李氏菌在增菌和生化中要求培养温度在30℃左右。
3.其他一般在36℃左右
三、接种方法
常用的方法主要有划线、三点接种、穿刺接种、倾注接种、涂布接种、液体接种。
四、革兰氏染色方法
染色时间的掌握、冲洗的方法。
五、划线获得单个菌落的方法,划不出单个菌落的原因
1.平板上有过多的水分;
2.划线时接种环未经反复灼烧。
3.多区划线,三区或四区划线。
六、涂布和倾注的区别
1.涂布利于观察,但由于涂布棒上会带有少量的菌液,影响计数的准确性。
2.涂布更为准确,但不利于观察菌落的状态。
七、培养基配制时应注意的问题
1.灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量。
2.琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分。
3.培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏。
4.含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。
八、板的保存
大多数平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。
九、产品的保存
1.干粉培养基:避光干燥,结块后不能使用。
2.亚碲酸钾卵黄增菌液、50%卵黄乳液等:冷冻保存,使用时,要常温解冻,避免水浴加热。
3.抗生素类:冷藏保存,温度过高会导致灵敏度的下降。
4.兔血浆:冷藏保存少量的红色不会影响结果。