这个夏天又有新的小伙伴进入实验室工作了,无菌操作是细胞培养中至关重要的一环,我们一起来看看,无菌操作中,有哪些需要注意的小细节吧。
1. 设置专用细胞间,有条件的情况下,设立无菌操作间和缓冲间;无菌室内的地面、墙壁平整,不易藏污纳垢,便于清洗;无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染。
2. 无菌操作间备有常用消毒剂,方便使用。如70%酒精,0.1%新洁尔灭溶液等。细胞间应保持常年干净清洁,地面,桌面等,需用消毒剂定期消毒,并且需紫外灯照射。
3. 实验所用物品,如枪头,移液管,培养瓶,需无菌包装,并存放在指定指定地点,开封后需放置在紫外消毒后的超净工作台中,并尽快使用完。
4. 细胞培养液,以及其他试剂在使用前,确保均为无菌试剂,开启后需密封置于冷藏保存,并尽快使用。
5. 进入细胞间工作前,需先经紫外照射至少15min以上,超净工作台需经过同样照射处理,有条件的实验室在缓冲间更换专用工作服、鞋、帽子、口罩和手套(或用酒精再次擦拭双手)。
6. 从培养箱中取出细胞培养物,在开启的超净工作台中进行操作,操作过程中,务必注意,枪头,移液管等,不可接触除培养液外其他任何物体。操作过程中,如果有液体滴落在台面上,务必用消毒液擦拭干净。所有进出超净台的物品,务必喷洒酒精进行消毒,开始工作后,双手不得离开超净工作台,离开后,同样需要喷洒酒精消毒。
7. 尽量减少试剂瓶或培养瓶的开口时间和次数,细胞培养瓶在超净台中打开后,瓶盖应口朝下放置在工作台中,主要是防治超净台的灰尘等落入。开口应在酒精灯附近,瓶口及瓶盖需酒精灯外焰轻微灼烧消毒。
8. 做完实验后清理操作台,用消毒剂擦拭台面及操作台上的物品,为下一次实验做好准备。
9. 定期对培养箱进行紫外照射,酒精擦拭消毒,有培养液倾撒,务必清洁干净
10. 定期对超净工作台,培养箱,以及细胞间的过滤系统检查,并更换过滤器。
11. 选择合格的无菌培养耗材以及品质优良的培养箱。