一、准备工作
在进行细胞爬片之前,需要准备一些实验室常用的物品。这些物品包括:
1.封片剂:常用的封片剂有山梨酸钾、醋酸纤维素和凝胶硬化剂等。在选择封片剂时,需要考虑其对细胞的影响以及实验的需要。
2.封片液:封片液的配制需要根据实验的需要而定。一般来说,封片液应该是无菌的,并且需要保持一定的pH值。
3.无菌培养皿和器具:在进行细胞爬片的过程中,需要使用无菌的培养皿和器具。这些器具包括离心管、移液器、显微镜玻片、草履虫盖玻片等。
二、封片步骤
1.将细胞爬片做到需要封片的玻片上,将玻片放置在一个无菌的培养皿中。
2.使用移液器,将封片液滴在细胞爬片的表面上,使其完全覆盖细胞。
3.等待封片液干燥,通常需要2-3分钟。
4.使用无菌的显微镜玻片,将封片剂涂在封片液上。封片剂的量应该足够将整个封片覆盖住。注意尽量避免空气进入封片中。
5.将封片放置在一个无菌的培养皿中,并将其放入恒温培养箱中,以便封片剂的固化。
6.等待封片固化,通常需要30分钟。
7.将封片从恒温培养箱中取出,使用草履虫盖玻片将其覆盖住。封片现在已经可以进行显微镜观察了。
三、注意事项
在进行细胞爬片的封片过程中,需要注意以下几点:
1.封片液和封片剂应该是无菌的,并且需要保持一定的pH值。
2.封片液和封片剂的选择需要根据实验的需要而定。
3.封片剂的涂抹应该均匀,避免空气进入封片中。
4.封片的固化需要一定的时间,在此期间应该避免震动和扰动。
5.封片后应该立即进行显微镜观察,以避免封片的干燥和变形。
细胞爬片是细胞学实验中常用的一种技术。封片是这个过程中必不可少的一步。在进行细胞爬片的封片过程中,需要注意封片液和封片剂的无菌和pH值,封片剂的涂抹均匀,封片的固化时间,以及封片后的显微镜观察。通过正确的封片步骤,可以确保实验的准确性和可重复性。