一 探索新发现的功能未知的基因:
(1)通过生物信息学分析对该基因所编码蛋白质的空间结构及功能进行预测;
(2)应用分子生物学技术在细胞水平进行研究(蛋白表达,细胞定位,沉默或过表达对细胞功能的影响等);
(3)通过探讨与该基因蛋白相互作用的蛋白而确定新基因的功能;
(4)蛋白质结构域分析和结构测定。
二 检测组织或细胞中某个信号通路及其作用:
(1)样本的获得与培养(组织或细胞);
(2)免疫组化,免疫细胞化学定位;
(3)RT-PCR(Real time PCR), Western blot 检测通路关键信号分子的表达(mRNA水平,蛋白水平),蛋白修饰状态;
(4)检测通路相互作用蛋白(Co-IP等);
(5)检测信号通路活性;
(6)关键信号分子基因沉默或增强(沉默:抑制剂/siRNA/抗体/基因敲除动物;增强:激动剂/构建过表达载体转染);
(7)芯片/组学检测。
三 研究某药物对细胞实验
的作用及相关信号通路:
(1)药物刺激细胞(时间梯度,浓度梯度);
(2)检测药物对细胞的作用(毒性,增殖,凋亡,侵袭,迁移等);
(3)共聚焦显微镜定位相关作用分子;
(4)RT-PCR(Realtime PCR), Western blot检测通路关键信号分子的表达(mRNA水平,蛋白水平),蛋白修饰状态;
(5)检测通路相互作用蛋白(Co-IP等);
(6)检测信号通路活性;
(7)关键信号分子基因沉默(抑制剂/siRNA/抗体)后检测;
(8)芯片/组学检测。
以上是细胞实验
中常见的实验设计过程,基本在每篇 中,你都能看到这些类似的流程分析,但是不要以为只要流程对就能顺利发表了,在写作的过程中,也有一系列的问题需要你来注意的。在这就给大家总结几个要点:
1.题目,以研究结果为题,体现目的分子、生物学效应、疾病或细胞系。
2.摘要形式看杂志的具体要求,字数允许的情况下,方法结果尽可能详细;
3.对于前言注意逻辑性、连贯性、相关性和创新性;
4.在细胞实验
设计过程中要注意重复实验和多种细胞系的设置等科学实验的可重复性;
5.对于结果的描述,要避免单一重复的句型,变换句式;
6.对于讨论避免简单罗列前人的研究结果,要深入作出机制方面的讨论。