相信大家都知道，在进行研究方案设计时，除了要具有创新性和可行性，最好还能紧靠当前研究热点！说到研究热点，那就不得不提铁死亡。

铁死亡究竟是什么呢？怎样才能将铁死亡运用到自己的研究中呢？接下来就让我们共同了解铁死亡的基本知识，学习铁死亡相关的研究思路吧~

一、铁死亡概述 

今天我们将通过共同阅读一篇高分综述ferroptosis : mechanisms,biology and role in disease，来了解铁死亡的基本信息。

铁死亡是一种新型的细胞程序性死亡方式，其主要过程是由磷脂过氧化执行的，即细胞间、细胞内、环境中的信号刺激导致细胞发生磷脂过氧化，继而触发铁死亡。

磷脂过氧化是一个依赖于代谢产物活性氧ROS、含多不饱和脂肪酸链（PUFA-PL）和过渡金属铁的磷脂的过程。

通过上面这张图我们可以了解到，ROS、多不饱和脂肪酸的异常表达以及铁离子的异常变化，会导致磷脂过氧化发生异常变化，继而触发铁死亡的过程。

铁死亡的抑制途径主要分为3部分，如下图所示：

而脂质过氧化是铁死亡的标志。脂质过氧化的主要机制是在酶的作用下通过氧化还原反应进行，整个过程可以分为起动、繁殖和终止三个阶段（图中通过不同颜色箭头表示）。

从下面这张图我们可以了解到铁死亡中的代谢和细胞信号传导，多个代谢事件和信号通路都参与了铁死亡的调控：

二、案例解析

下面我们要了解的这篇文献名为poly(rC)-binding protein 1 represses ferritinophagy-mediated ferroptosis，其影响因子为10.787。

这篇文献的整体研究思路为：PCBP1负性地控制BECN1 mRNA，ALOX15 mRNA和脂肪生成，通过敲低PCBP1可增强铁蛋白吞噬，增加不稳定的铁池。亚铁积累促进线粒体功能障碍产生羟基自由基（OH·），ALOX15加速氧化多不饱和脂肪酸（PUFA）。氧化的PUFA与羟基自由基反应，产生脂质过氧化和铁死亡。我们可以通过下面这张图对文献整体内容进行梳理，这一研究思路是值得我们学习的。

作者先证实了PCBP1能够对癌细胞中的铁死亡过程产生影响，随后对于该过程的机制进行了进一步研究，最终证明PCBP1通过影响BECN1基因的表达、ALOX15基因的表达以及细胞内脂质水平对细胞内铁死亡进程产生影响。

三、总结

1.铁死亡的检测手段

（1）新陈代谢

• 通过CCK-8检测细胞活力

• 通过荧光探针配合流式细胞术和共聚焦显微镜，或商用试剂盒检测铁水平

• 关于脂质过氧化，可以通过荧光探针配合流式细胞术和共聚焦显微镜检测活性氧

• 对于铁死亡的标志蛋白，可以用Western blot进行检测

（2）形态观察

• 透射显微镜观察线粒体形态，细胞发生铁死亡时线粒体变小以及线粒体膜密度变大

• 线粒体观察，即向细胞内转染LifeAct-GFP荧光蛋白，一段时间后用有丝分裂追踪器观察线粒体形态

• 线粒体膜电位检测，可通过流式细胞仪收集TMRE阳性细胞的比例进行推测

2.常见的铁死亡标志物及其功能

3.铁死亡机制

（1）抑制GPX4诱导铁死亡

（2）抑制胱氨酸谷氨酸转运受体（systemXC-）诱导铁死亡

（3）p53介导铁死亡

4.基因差异表达和生存曲线相关数据库

（1）UALCAN

        官方网址：http://ualcan.path.uab.edu/index.html

5.基因差异表达和生存曲线相关数据库

（1）UALCAN

        官方网址：http://ualcan.path.uab.edu/index.html

（2）GEPIA

        官方网址：http://gepia.cancer-pku.cn/index.html

（3）StarBase数据库

        官方网址：http://starbase.sysu.edu.cn/panCancer.php

6.铁死亡相关数据库

        FerrDb

        官方网址：http://www.zhounan.org/ferrdb/current/