PCR/q-PCR点样技巧:为了多快好省的整理q-PCR的结果(Excel表),选择如下更实用、更方便的点样方式。以实用Bio Rad公司的q-PCR仪为例,点样方式可参考下图:
1.所有的试剂都放在冰上操作;
2.第一部分:Master Mix和引物加在一起混匀(按照上图中横向蓝色箭头标记的方向点样),第二部分:ddH2O和模板加一起混匀(按照上图中纵向黑色箭头标记的方向点样);
3.每部分多配置1-2个孔(按照每孔加样的总体积和总管数),防止加样过程损失造成最后的孔不够的现象;
4.两部分都各自混匀加入8连管的孔,使用涡旋仪混匀,离心去除气泡减少加样误差;
5.每个样品至少3个平行孔(按照上图中横向红色箭头的标记)。