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动物细胞分离培养实验转移液体的基本要求

2022-08-11 10:24:03
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  动物细胞实验室一般采用吸管吸取、移动液体或滴加样品,量取少量或微量液体则采用移液器(加样器)。

  吸管主要分为刻度吸管、无刻度吸管。刻度吸管主要用于吸取、转移液体,常用的有1 mL、2 mL、5 mL、10 mL等规格。无刻度吸管又有直头吸管和弯头吸管之分。弯头吸管除可作吸取、转移液体外,还常用于吹打、混匀及传代细胞。

  移液器(加样器),俗称移液枪,用干吸取移动液体或滴加样品,移液枪可根据需要调节量的大小,吸量准确、方便。特别是微量移液枪,可保证实验样品或试剂取量精确,重复性好。当前,有可高温消毒、多通道的各类移液枪供使用者选择,能确保移液准确、快速、方便且达到无菌要求。

  1.准确性

  为保证取样的准确性,吸管、移液枪应定期校准。用移液枪移液之前,要保证移液枪、枪头和液体处于相同温度。为确保移液的精度和准确,安装了新的移液枪枪头或增大了容量后,应该吸取、排放需转移的液体2~3次。

  2.规范性

  用吸管或移液器转移液体时应严格按操作规程使用,注意操作规范,避免人为错误。

  3.移液枪的使用

  (1)选择量程合适的移液枪

  移液枪只能在特定量程范围内准确移取液体,如超出最大或最低量程,会损坏移液枪并导致计量不准。

  (2)设定容量值

  通过调节旋钮将容量迅速调整至接近的预想值,将移液枪刻度显示窗平行放至自己眼前再慢慢将容量值调到预想值,从而避免因视觉误差造成的影响。

  (3)装配移液枪枪头

  把套筒顶端插入枪头,轻轻用力下压的同时逆时针转旋转至上紧即可。

  (4)预洗移液枪枪头

  移液之前,要保证移液枪、枪头和液体处于相同温度。安装了新的枪头或增大了容量后,应该吸取、排放需转移的液体2~3次,以确保移液的精度和准确。在吸液之前可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取黏稠或密度与水不同的液体时)。

  (5)移液

  吸取液体时,移液枪保持竖直状态,将枪头插人液面下2~3 mm。可以采取以下两种移液方法:

  ①前进移液法:用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点;接着将按钮按至第一停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体;最后松开按钮。

  ②反向移液法:此法一般用于转移高黏液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理是先吸入多于设定量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体;先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点;接着将按钮按至第一停点排出设定量程的液体,继续保持按住按钮位于第一停点(千万别再往下按),取下有残留液体的枪头,弃之。

  (6)移液枪的放置

  使用完毕,可以将移液枪竖直挂在移液枪架上,但小心别掉下来。移液枪枪头有液体时切勿将移液枪水平或倒置,以防液体流人活塞室腐蚀活塞弹簧。

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