资讯动态

如何避免细胞培养过程中的污染

2022-09-01 10:31:39
|
访问量:111632

  主要还是考虑无菌环境,尽量做好操作台的灭菌,别把培养基滴落在生物安全柜的入风口,别在培养箱里把培养基打翻。这两个地方霉菌一旦滋生,那你就只能等着用甲醛熏蒸了。

  紫外无法杀灭霉菌,酒精也不行,只能用甲醛熏蒸,但是一定要注意安全。复苏的时候,水浴锅也需要进行灭菌处理。一旦出现污染,不要急,能救的就用抗生素救一下,但是一般情况下,选择扔掉。避免交叉感染,要不只能整个实验室消毒了。

  如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?

  原则上:直接灭菌后丢弃之。

  当重要的培养污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。

  高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性,因而,做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如霉素b和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。

  1.在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。

  2.分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,霉素b推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。

  3.每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。

  4.确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2~3代。

  5.在无抗生素的培养基中培养细胞一代。

  6.重复步骤4。

  7.在无抗生素的培养基中培养4~6代,确定污染是否以已被消除。

图例

文章推荐
细胞凋亡的表现有哪些(了解细胞凋亡的特征和表现)
2023-10-22
细胞凋亡是一种重要的细胞死亡方式,它在生物体的正常发育、组织修复···
BrdU参入法细胞周期测定步骤
2023-04-07
BrdU参入法实验方法原理:细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一···
细胞转染实验怎么做,影响转染的因素有哪些
2023-03-21
细胞转染定义:将外源分子如DNA RNA等导入真核细胞的技术。瞬时转染:···
不受噬菌体侵袭的细胞(探索细胞免疫机制)
2023-11-02
不受噬菌体侵袭的细胞是指在细菌感染中能够抵抗噬菌体(一种寄生于细···
新冠重大发现!哈佛医学院魏文毅团队等拿下中科院1区15.8分:揭示广谱抗冠状病毒新策略
2024-11-22
2019年新冠疫情爆发后,虽然时间转眼过去几年,但是它的遗留效应仍然···
超全汇总!这108种实验室常见的细胞系赶紧了解一下!
2024-11-20
在细胞培养中,我们常常会接触到各种各样的细胞类型,它们来源于不同···
浙江大学王青青团队拿下中科院1区21.8分的秘诀:揭示FXYD3在银屑病中的作用机制
2024-11-18
“做科研重在解决真问题”,相信这话对于很多科研学者来说,都是耳熟···
鼻炎真的能治好吗?中科院1区28.3分!上海交大李敏团队揭示过敏性鼻炎加重原因!
2024-11-15
鼻炎是一种异质性疾病,指的是鼻腔粘膜和粘膜下组织的炎症。它通过对···
  • 业务咨询

    业务咨询专线:133 7682 0615

    Email:lxyjy@wie-biotech.com

在线留言(即刻联系为您提供专业的解决方案) ×
留言咨询

感谢您的关注,如有需要请留言,我们会尽快和您联系!