悬浮细胞克隆的分离

2022-10-13 10:36:05

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　　简介

　　用加样枪或Pasteur吸管吸取集落，移至培养瓶或多孔板的培养孔中。

　　操作方法

　　悬浮细胞克隆的分离

　　原理

　　用加样枪或Pasteur吸管吸取集落，移至培养瓶或多孔板的培养孔中。

　　材料与仪器

　　生长培养基多孔板培养瓶解剖显微镜移液器粗头笔黄色枪头

　　步骤

　　1. 用倒置显微镜观察培养皿中的细胞，用毡制粗头笔或Nikon标记笔标记出集落。

　　2.24孔板的每一孔中加1 ml培养基。

　　3.解剖显微镜（20~50×放大）下挑取集落

　　(a)每一个细胞集落用一个枪头（加样枪上的黄色枪头）。

　　(b)将移液器调至100μl。

　　(c)先用枪头吸大约50μl的培养基，将该枪头对准要分离的集落，在集落内轻轻吸取剩余的50μl。

　　4.将吸取物移至24孔板，用培养基冲洗集落，如果培养基中含美希索，集落就会固定、黏附，然后生长；如果培养基含有琼脂，则需用吸管在培养孔内上下吹吸集落几次，分散琼脂。细胞克隆也可以直接移至竖直放置的25 cm2的塑料培养瓶中。

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