若已知细胞或者组织样本依然处于活细胞状态，但是用TUNEL试剂盒检测，出现了非特异性染色，和处理过的荧光信号一样强，甚至比阳性对照组荧光信号还要强。
1 样本处理不当
1）使用酸性或碱性固定液，导致DNA损伤。建议使用pH中性的固定液固定组织或者细胞。
2）固定液浓度过高，导致细胞自溶、DNA链不规则断裂、造成假阳性。建议使用4%多聚甲醛溶液（溶于PBS）。
3）固定时间过长，导致细胞自溶、DNA链不规则断裂、造成假阳性。建议控制固定时间在4 ℃放置25 min。
4）蛋白酶K处理时间过长，破坏核酸结构，出现假阳性。建议适当缩短处理时间。
5）蛋白酶K浓度过大，破坏核酸结构，出现假阳性。建议适当调整蛋白酶 K溶液浓度，一般工作液浓度为20 μg/mL。
2 染色操作不当
6）TUNEL染色时间过长。建议一般是 37 ºC 孵育60 min，可以根据凋亡损伤程度，可长至2 h，但要结合背景着色。
7）未充分清洗样本。染色后PBS清洗次数可增加到5次，来避免切片的非特异性染色。
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