做生物、医学实验的人都知道,细胞迁移是指细胞在接收到迁移信号或感受到某些物质的梯度后而产生的移动,我们熟知的胚胎发育、血管生成、伤口愈合、免疫反应、炎症反应、动脉粥样硬化、癌症转移等过程中都涉及细胞迁移,其中细胞迁移和增殖的异常变化更是检测癌症进程的重要指标。
目前,市面上检测细胞迁移能力的细胞迁移实验主要是两个,一个是Transwell实验,一个是划痕实验!
细胞划痕实验是简捷测定细胞迁移运动与修复能力的方法,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间是一种简单易行的检测细胞运动的方法。
细胞划痕实验优势是简单、经济。做划痕实验来检测细胞迁移,这样的情况多用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力,操作起来也不难,就是耗时间,只要你愿意等就没问题,当然,实验中要提醒的一点是,就是我们一定要注意划线力度,不要过重也不要太温柔了,过重会把一整块细胞都拉下来,过轻细胞边缘不整齐,所以对于科研小白来说,第一次正儿八经做划痕实验前,多练练手再做吧!
Transwell实验的基本原理是将transwell小室放入培养板中,小室内称为上室,培养板内称为下室,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔,上室内添加上层培养液,下室内添加下层培养液。将细胞种在上室内,由于膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。
但Transwell实验相对于划痕实验来说,实验成本较高,经费不足的实验室一般都不考虑,但有足够经费支持的还是推荐用这个方式做细胞迁移实验,毕竟划痕可能不能太好的排除增殖带来的影响,而transwell大部分则能很好反应。