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2022-01-10
分子实验-免疫组织化学流程步骤
免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是基于抗原抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色来对组织内抗原进行定位、定性、定量的一项技术。根据抗原抗体反应和化学显色原理。从待测组织或细胞中提取蛋白作为抗原,先与一抗结合形成抗原抗体反应物,再与生物素或荧光素标记的二抗反应,通过化学显色
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2022-01-10
分子实验-免疫组织化学 (IHC) 原理
免疫组织化学 (IHC) 是一种通过利用抗体与生物组织中的抗原特异性结合的原理来检测组织切片细胞中的抗原或半抗原的方法。抗体-抗原结合可以以不同方式可视化。酶,例如辣根过氧化物酶 (HRP) 或碱性磷酸酶 (AP),通常用于催化产生颜色的反应。IHC 广泛用于许多研究和临床实验室,因为这种技术可以可视化细胞内和
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2022-01-10
分子实验-免疫荧光的抗体验证
免疫荧光 ( IF ) 涉及用特异性一抗和荧光染料偶联的二抗标记细胞蛋白(间接方法)或用直接偶联的一抗进行标记(直接方法)。大多数荧光显微镜允许检查单个样品中两种或三种荧光标记蛋白质的亚细胞定位、相对表达水平和/或活化状态(例如磷酸化状态)。在研究组织中具有多个标记的细胞子集时,执行多重分析的能力消除了
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2022-01-10
分子实验-免疫荧光染色工作流程
每个免疫荧光染色方案由四个主要步骤(培养、固定、染色、成像)组成免疫荧光染色是一种非常敏感的方法,可能需要排除故障。协议中的微小变化可能导致不再具有可比性的不同结果。因此,在您的特定方案中精确保持完全相同的条件(例如,细胞密度、抗体稀释度、孵育温度和孵育时间)非常重要。以下是间接免疫荧光染色
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2022-01-09
分子实验-免疫荧光 (IF) 技术概述(技术应用范围解析)
免疫荧光 (IF) 使用抗体和荧光检测来研究目标蛋白在固定细胞或组织中的定位、相对表达和激活状态。IF 广泛用于不同的研究领域。IF 可用于回答以下问题:哪些细胞或组织表达我的目标蛋白?我的靶蛋白的表达和/或激活如何响应实验扰动而变化?靶蛋白定位在细胞/组织的哪个位置?在细胞或组织结构的背
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2022-01-09
分子实验-间接免疫荧光的原理及步骤
间接免疫荧光:一种简单而现代的方法测试原理为了测定自身抗体或针对感染因子的抗体,咳嗽细胞、治疗组织切片或纯化的、生化特征的物质被用作抗原底物。如果样品呈阳性,稀释的血清样品中的特异性抗体会附着在与固相偶联的抗原上。在第二步中,附着的抗体用荧光素标记的抗人抗体染色,并用荧光显微镜观
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2022-01-08
分子实验-一种免疫荧光生物图像归一化的新方法
单细胞的多重免疫荧光生物成像及其在组织中的空间组织为未来精准诊断和治疗的发展提供了广阔的前景。当前的多路复用管道通常涉及跨多个组织载玻片的多轮免疫荧光染色。这引入了可以隐藏潜在生物信号的实验批次效应。重要的是要有强大的算法来校正批次效应,同时不会将偏差引入数据。数据归一化方法的性能可能因不同的分
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2022-01-08
分子实验-培养细胞上细胞内抗原的免疫荧光染色
在培养细胞方案上对细胞内抗原进行免疫荧光染色材料磷酸盐缓冲盐水 (PBS) (137mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na 2 HPO 4 , 1.76mM KH 2 PO 4 , pH 7.4)Tris 缓冲盐水 (TBS) (50mM Tris, 150mM NaCl, pH 7.4)固定试剂:PBS 中的 4% 甲醛或 100% 冰冷的 MeOH透化试剂:1% Triton X-100 的 PBS (w:v)
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2022-01-08
分子实验-组织免疫荧光方案
免疫荧光利用带有荧光染料的抗体的特异性来识别其抗原,因此可以通过荧光染料在荧光显微镜下观察目标分子的分布。免疫荧光被广泛用作免疫染色的一个例子,并且是免疫组织化学的一个具体例子,它利用荧光团来可视化特殊生物分子的位置。有两类免疫荧光技术,包括直接和间接。以下是组织和单层细胞中间接免疫荧光的协
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